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快速冰冻病理技术
;概述
冰冻病理的目的
冰冻切片制备
快速病理的注意事项
术中快速病理诊断会诊意见及签发
冷冻切片后剩余组织的处理
资料管理
;一、概述;快速冰冻病理技术发展;目前,此项技术已普遍应用于临床,解决手术中的病理诊断问题。
随着冰冻切片技术和临床外科手术的发展,要求做冰冻的病例逐年增多。
如:乳腺、甲状腺、卵巢等等。
;冰冻病理的目的;乳腺纤维腺瘤;乳腺浸润癌;淋巴结转移癌;卵巢粘液性囊腺瘤
(交界性);二、准备工作;冰冻快速病理诊断知情同意书;
--------科患者-------(男/女,年龄--------岁,住院号----------)和家属已知晓上述情况,同意手术中快速冰冻病理检查。
签字人----------与病人关系----------------
身份证号------------------
年月日;2.向病理科递交快速活检申请单
临床手术医师应向病理科递交快速活检申请单
申请单需填写:
患者的病史,
重要的影像学、
实验室检查结果和
提请病理医师特别关注的问题等。
尽可能不在手术进行过程中临时申请快速活检。
;
3.手术中快速活检应由副主任医师以上的病理医师主持。
尚不具备相应条件的病理科不应勉强开展手术中快速活检业务。;4.负责快速活检的病理医师应了解患者的:
①临床情况
②手术所见
③既往有关的病理学检查情况。;三、快速冰冻切片的制备
(一)申请单和标本的验收、编号和登记
手术中快速活体组织病理学检查申请单和标本的验收、编号和登记参见普通活体组织病理学检查常规。
时间的记录!
(介绍附属医院情况);(二)标本的巨检、取材和记录
1.病理科验收快速活检申请单和标本后,应参照普通活体组织病理学检查常规的有关规定,立即进行标本的巨检、取材和记录。
2.主持快速活检的病理医师应亲自参与标本的巨检和取材(或指导取材)。
3.通常选取具有代表性病变组织1或2块,需要时,增加取材块数;
(三)组织切片的制备
冰冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冰冻切片法,二氧化碳冰冻切片法???甲醇循环制冷冰冻切片法,半导体冰冻切片法和氯乙烷冰冻切片法等。
现在常用的是低温恒冷箱冰冻切片法。;低温恒冷箱冷冻切片机;
3.消毒键,启动该键,可对工作间进行消毒。
4.两个快速自动进退键,两个微小进退键,
一个手动旋钮,调节修组织块时的进退。
冷冻箱内左边的冷冻台,温度可达-60℃左右,中间为一台切片机,工作间的温度在0-30℃之间。;;操作过程;
3.将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,将组织修平。
4.调好切片厚度,一般在5~10um间。
5.调好防卷板。切片时,切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道,平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板,取一载玻片,将其附贴上即可。;6.应视不同的组织选择不同的冷冻度。
1.切未经固定的脑组织、肝组织和淋巴结时,温度不能调太低,在-10--15℃左右。
2.切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时,可调在-15~20℃左右,
3.切带脂肪的组织时,应调至-25℃左右,切含大量的脂肪时,应调至-30℃。;;冰冻切片的快速染色法;染色方法;快速冰冻切片制备流程;;1.完成冷冻HE染色切片制备的时间通常为20~25min。
2.恒冷箱切片机制片:至少应于切片前1h开机预冷,冷室温度一般为-15~-20℃。
3.常规开展冷冻切片快速病理的病理科,恒冷箱切片机宜处于24h恒温待机状态。
;冰冻切片时的注意事项;
2.多例多块组织同时需做冰冻切片时,可各自放于不同的支承器上,于冷冻台上冻起来,然后依据不同的编号,依序切片,这样做既不费时也不会乱。
3.放置组织冰冻前,应视组织的形状及走势来放置,如果胡乱放置,就不能收到很好的效果。;
4.临床快速冰冻切片,不要预先固定!
一是为了争取时间,二是固定了的组织,反而增加了切片的难度。
如果使用未完全固定的组织做冰冻切片,就会出现冰晶。这是因为含水的固定液在组织未经固定前,其中的水份也可渗入到组织中去,当冰冻发生时,这些水份就存留于组织中,形成了冰晶。
;5.当切片时,如果发现冰冻过度时,可将冰冻的组织连同支承器取出来,在室温停留
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