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硫酸铵的鉴定实验报告
沉淀反应实验报告
实验蛋白质的沉淀反应与颜色反应
一、实验目的
掌握鉴定蛋白质的原理和方法。熟
悉蛋白质的沉淀反应,进一步熟悉蛋白
质的有关反应。
二、实验原理
蛋白质分子中某种或某些集团可与
显色剂作用,产生颜色。不同的蛋白质
由于所含的氨
基酸不完全相同,颜色反应亦不完
全相同。颜色反应不是蛋白质的专一反
应,一些非蛋白物
质也可产生同样的颜色反应,因此
不能根据颜色反应的结果来决定被测物
是否为蛋白质。另
外,颜色反应也可作为一些常用蛋
白质定量测定的依据。蛋白质是亲水性
胶体,在溶液中的
稳定性与质点大小、电荷、水化作
用有关,但其稳定性是有条件的,相对
的。如果条件发生
了变化,破坏了蛋白质的稳定性,
蛋白质就会从溶液中沉淀出来。
三、实验仪器
1、吸管2、滴管3、试管4、
电炉5、ph试纸6、水浴锅7、移液
管
四、实验试剂
1、卵清蛋白液:鸡蛋清用蒸馏水稀
释10-20倍,3-4层纱布过滤,滤液放在
冰箱里冷藏
备用。
2、0.5%苯酚:1g苯酚加蒸馏水稀
释至200ml。
3、millon’s试剂:40g汞溶于60ml
浓硝酸(水浴加温助溶)溶解后,冷却,
加二倍体
积的蒸馏水,混匀,取上清夜备用。
此试剂可长期保存。
4、尿素晶体
5、1%cuso:1gcuso晶体溶于蒸馏
水,稀释至100ml446、10%naoh:10g
naoh溶于蒸馏水,稀释至100ml
7、浓硝酸
8、0.1%茚三酮溶液:0.1g茚三酮溶
于95%的乙醇并稀释至100ml.
9、冰醋酸
10、浓硫酸
11、饱和硫酸铵溶液:100ml蒸馏水
中加硫酸铵至饱和。
12、硫酸铵晶体:用研钵研成碎末。
13、95%乙醇。
14、醋酸铅溶液:1g醋酸铅溶于蒸
馏水并稀释至100ml
15、氯化钠晶体
16、10%三氯乙酸溶液:10g三氯乙
酸溶于蒸馏水中并稀释至100ml
17、饱和苦味酸溶液:100ml蒸馏水
中加苦味酸至饱和。18、1%醋酸溶液。
五、实验步骤
蛋白质的颜色反应
(一)米伦(millon’s)反应
1、苯酚实验:取0.5%苯酚溶液1ml
于试管中,加millon’s试剂0.5ml,电
炉小心加热
观察颜色变化。
2、蛋白质实验:取2ml蛋白液,加
millon’s试剂0.5ml,出现白色的蛋白质
沉淀,小
心加热,观察现象。
(二)双缩脲反应
1、取少量尿素晶体放在干燥的试管
中,微火加热熔化,至重新结晶时冷却。
然后加
10%naoh溶液1ml,摇匀,再加2-4
滴1%cuso4溶液,混匀,观察现象。
2、取蛋白液1ml,加10%naoh溶液
1ml,摇匀,再加2-4滴1%cuso4溶液,
混匀,观察
现象。
(三)黄色反应
取一支试管,加入1ml蛋白液及浓
硝酸5滴。加热,冷却后注意颜色变化。
然后再加入
10%naoh溶液1ml,观察颜色有什
么变化。
(四)茚三酮反应
取蛋白液1ml于试管中,加4-8滴茚
三酮溶液,加热至沸,即有蓝紫色出现。
蛋白质的沉淀
(一)蛋白质的盐析作用
1、试管中加蒸馏水3ml,加固体硫
酸铵至饱和。另一支试管加蛋白液2ml,
再加入饱和
硫酸铵溶
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