规模化羊场细菌性和支原体肺炎防治技术.docxVIP

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规模化羊场细菌性和支原体肺炎防治技术规范

1范围

本文件规定了规模化羊场细菌性和支原体肺炎的诊断和防治。

本文件适用于羊饲养场和动物疫病防控等单位对细菌性和支原体肺炎的防控和指导。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T5030无公害农产品兽药使用准则3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4流行特点

本病一年四季均可发生和流行，具有明显的季节性，冬季和早春季节多见。当发生天气寒冷、空气干燥、沙尘严重或羊群拥挤等原因时易发生本病，接触传染性很强，常呈地方流行性。引进纯种羊较本地羊更易感，感染后羔羊较成年羊临床症状更严重。

5临床特征

病羊表现为以下一种或多种临床特征，以精神沉郁、体温升高、咳嗽、流涕为主要特征，包括呼吸短促、黏膜高度充血、发绀、按压胸壁表现敏感、疼痛、眼有浆液性、脓液性分泌物、流泪、头颈伸直、腰背拱起，有的发生腹泻，甚至口腔中发生溃疡等症状。

6诊断

6.1非感染因素分析

本病诊断首先要排除因饲养管理不当、环境因素、应激因素和异物导致的非细菌感染性肺炎。在此基础上，进行病原检测。

6.2病原诊断

6.2.1病原

引起羊细菌性肺炎的病原体主要有：

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——羊溶血性曼氏杆菌（Mannheimiahaemolytica，Mh）；——羊多杀性巴氏杆菌（Pasteurellamultocida，Pm）；

——马链球菌兽疫亚种（Streptococcusequisubsp.Zooepidemicus，Sez）；

——结核分枝杆菌复合群（Mycobacteriumtuberculosiscomplex）；——肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae，Kp)；

——山羊支原体山羊亚种（Mycoplasmacapricolumsubsp.capricolum，Mcc）；

——山羊支原体山羊肺炎亚种（Mycoplasmacapricolumsubsp.capripneumoniae，Mccp）；——丝状支原体山羊亚种（Mycoplasmamycoidessubsp.capri，Mmc）；

——绵羊肺炎支原体（Mycoplasmaovipneumoniae，M.ovi）。

6.2.2样品采集与处理6.2.2.1鼻拭子

棉拭子深入至鼻腔内部采集鼻腔分泌物，放入装有不含抗生素的PBS或生理盐水的5mL冻存管中，编号、记录。2℃~8℃保存，24h内运回实验室进行检测。

6.2.2.2组织样品

将病羊剖检后无菌采集部分羊气管、肺脏和胸水等组织样本，编号、记录。2℃~8℃保存，24h内运回实验室进行检测。

6.3细菌的分离

6.3.1.1鼻拭子的分菌

将棉拭子样品至于20mL无菌生理盐水中旋涡混匀30s，静置1min。吸取50μL上层液体，均匀涂布在TSA琼脂平板（参见附录A中表A.1）及支原体琼脂培养基（参见附录A中表A.2）上。倒置于37℃培养16h后观察菌落形态。

6.3.1.2组织样本的分菌

用经火焰灭菌并冷却的接种环蘸取病料内部组织后划线接种于TSA琼脂平板及支原体琼脂培养基，倒置37℃培养16h后观察菌落形态。

6.3.2核酸检测

收集上述菌落至1.5mL离心管中，12000r/min离心后弃上清液，加入100μL灭菌水重悬沉淀后反复冻融3次，12000r/min离心10min，取上清液作为DNA模板，引物序列参见附录B，混匀，进行PCR扩增，同时设置阳性对照和阴性对照。扩增条件为95℃预变性3min；95℃变性20s，55℃退火30s，72℃延伸40s，32个循环；72℃延伸10min，4℃保存。

PCR扩增产物测序后，测序结果与标准序列进行比对。

7防控

7.1产羔管理

7.1.1产房在生产前彻底消毒，保暖。

7.1.2新生羔羊脐带留存长度5cm～10cm，且用5%～10%碘酊浸泡2min～3min完成消毒。

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7.2饲喂管理

7.2.1羔羊岀生后1h内吃足初乳。

7.2.2对哺乳母羊，乳头彻底消毒干净，防止致病微生物传给羔羊。

7.2.3有条件牧场应按照初生羔羊体重的8%，人工哺喂经巴氏消毒的初乳，奶温在36℃~38℃,饲喂7d。

7.2.4哺乳壶、桶、奶嘴、毛巾等哺乳用具要严格用开水煮沸