微生物检验实验室链球菌属标准操作规程.pdf

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微生物检验实验室链球菌属标准操作规程

1.概述

链球菌是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球

菌。该菌属种类繁多,目前临床上仍延用Lancefield血清学

方法进行分群(A、B、C、D、F、G群),或根据溶血现象

(β溶血、α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血)进行分类。

2.标本类型

血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3.鉴定

3.1形态与染色:革兰阳性球菌,固体培养基上单个或

成双排列,较少呈链状排列;肉汤培养基中呈长链排列;从

脓液、尿液和痰液等标本直接涂片镜检,呈单个、成双或短

链排列。

3.2培养特性:在血琼脂平板上菌落可出现三种溶血反

应:a溶血周围有灰绿色的狭窄溶血环;B溶血周围有明显

较大的完全透明环;。溶血(不溶血)无异常变化。周围有

灰绿色的狭窄溶血环;肺炎链球菌菌落中央呈脐窝状、表面

光滑、灰色、扁平,周围有草绿色溶血环。

3.3生化反应:触酶试验阴性,对各种碳水化合物的分

解因菌种而异,链球

菌不被胆汁溶解。肺炎链球菌分解菊糖,胆汁溶菌试验

阳性,Optochin试验敏(抑菌环14mm)。

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3.4鉴别要点

3.4.1本菌特征:革兰阳性球菌,单个、成双或链状排

列,菌落较小、可出现:a溶血、B溶血或不溶血,触酶试

验阴性。

3.4.2根据溶血及关键性试验,对链球菌进行推测性鉴定

分群:

A群链球菌(化脓性链球菌):β溶血,杆菌肽敏感。

B群链球菌(无乳链球菌):β溶血,CAMP试验阳性,

马尿酸钠试验阳性。

C群链球菌(似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等):

CAMP试验、马尿酸钠、65g/L氯化钠耐盐试验均为阴性,

杆菌肽耐药(抑菌试验阴性)。

D群非肠球菌(马肠链球菌、牛链球菌、变形链球菌等):

胆汁七叶苷试验

阳性,65g/L氯化钠耐盐试验为阴性。

D群肠球菌(粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌和坚忍肠

球菌等):胆汁七叶

苷、65g/L氯化钠耐盐试验阳性,45℃生长。现归属于

肠球菌属。

C、F及G群链球菌的鉴定常需用血清学方法。

非B溶血链球菌的鉴别见表5-34

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表5-34非B溶血链球菌的鉴定

菌名Optochin试验胆汁溶菌试验

胆汁七叶苷试验

肺炎链球菌+

+-

牛链球菌-

-+

其他草绿色链球菌群

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