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倾注法实验报告

篇一:微生物实验报告

学号:

微生物学大实验班级:姓名:

1.培养基的配置及消毒灭菌

1.1通用培养基的配制(液体、固体、半固体三种)

1.1.1实验目的

(1)了解配制微生物培养基的原理和培养基的种类。

(2)掌握配制微生物通用培养基的一般方法和操作步

骤。

1.1.2实验原理

培养异养细菌最常用的培养基是牛肉膏蛋白胨培养基,

它是一种天然培养基。牛肉膏是牛肉浸液的浓缩物,含有丰

富的营养物质,它不仅能为微生物提供碳源、氮源,还含有

多种维生素。蛋白胨是酪蛋白、大豆蛋白或鱼粉等经蛋白酶

117

水解后的中间产物,含有?、胨和氨基酸等丰富的含氮素营

养物,因此完全能满足大多数异养细菌对营养的需要。

1.1.3材料和器皿

(1)试剂:牛肉膏、蛋白胨,nacl,1mol/Lnaoh,1mol/Lhcl。

(2)器皿:台秤,玻璃烧杯,搪瓷烧杯,三角瓶,量

筒,漏斗,试管,玻璃棒等。

(3)其他:ph试纸,牛角匙,牛皮纸,棉花,纱绳,

灭菌锅等。

1.1.4方法和步骤

1.配制牛肉膏蛋白胨培养基

(1)配方及配量:牛肉膏1.5g,蛋白胨5g,nacl2.5g,

琼脂(固体6g半固体

0.4g液体不加)蒸馏水500ml

(2)称取药品:按照营养基配方与配量分别称取各药

品,取少于总量的水于烧杯

中,将培养基成分(琼脂除外)逐一加入水中待溶。

(3)加热溶解:将烧杯放在石棉网上,用文火加热,

并不断用玻璃棒搅拌,使各

药品快速溶解,然后补水至500ml。

(4)调节ph:用1mol/lnaoh调ph至7.2—7.4.避免

调过碱,应缓慢加入,边

加入边搅拌,并用ph试纸测酸碱度值。

217

(5)分装:将配制好的培养基分装到相应的玻璃器皿

中,并在固体和半固体培养

基中加入琼脂,贴好标签,待灭菌。

1.2加压蒸汽灭菌法

1.2.1实验目的

懂得加压蒸汽灭菌原理及其安全使用的注意事项。

1.2.2实验原理

以加热密封锅体内的水和水蒸气的压力来提高锅体内

蒸汽温度而达到对物品灭菌的目的。

1.2.3方法和步骤

(1)加水:取出装料桶,往锅内加水至与搁架圈同样

高度为止。

(2)装料:将待灭菌的物品放入装料桶内并放回锅。

(3)加盖

(4)排气:在水煮沸后,以蒸汽驱赶锅内的空气沿排

气软管从排气阀中溢出,待空气排尽后,才可关闭气阀继续

加热。

(5)升压、保压、降压

(6)取料

1.2.4注意事项

(1)注意检查锅体和锅盖上的部件是否完好,并严格

按照操作程序进行,避免发生各类意外事故。

317

(2)灭菌时切勿擅自离开岗位,要注意压力表指针动

态;要按培养基中的营养成分的耐热程度来设置合理的灭菌

温度与时间,以免营养成分过多被破坏。

(3)务必待锅压下降到零后再打开排气阀和锅盖,否

则因锅内压力突然下降,使瓶装培养基或其他液体因压力瞬

时下降而发生复沸腾,从而造成瓶内液体沾湿棉塞或溢出等

事故。

(4)在放入灭菌料桶前,切记应往锅体内加入适量的

水,若锅体内无水或水量不够等均会造成在灭菌时引发重大

事故。

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一线教师,长期在一线从事教学工作。

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