色谱分析法课件.pptx

色谱技术Chromatograph

;1-1色谱、色谱法、色谱分析法

chromatography;1-1色谱、色谱法、色谱分析法

chromatography;1-2色谱法基本概念（concepts）;1-2色谱法基本概念（concepts）;1-2色谱法基本概念（concepts）;1-2色谱法基本概念（concepts）;1-3色谱法的本质—分离依据;1-3色谱法的本质—分离依据

(separationbasis);1-3色谱法的本质—分离依据

(separationbasis);1-3色谱法的本质—分离依据

(separationbasis);1-3色谱法的本质—分离依据

(separationbasis);1-3色谱法的本质—分离依据

(separationbasis);1-3色谱法的本质—分离依据

(separationbasis);1-3色谱法的本质—分离依据

(separationbasis);气相色谱分析过程;1-4色谱法分类(classification);1-4色谱法分类(classification);1-5应用实例

Examplesofapplication;G.C分析方法;第一节定性分析;第一节定性分析;第一节定性分析;二.未知样品的分析方法:;;第一节定性分析;第一节定性分析;t/R(7)=174.0mm,t/R(8)=373.40cm,t/R(X)=310.6mm

;=776;第二节定量分析;第二节定量分析;二、峰面积的测量

（1）三角形法

A=1.065hW1/2

适应：峰形对称、色谱峰不很窄

（2）峰高X平均峰宽法

A=hX(W0.15+W0.85)/2

W0.15—峰高0.15倍处峰宽

W0.85—峰高0.85倍处峰宽

适应：不对称峰，拖尾峰;第二节定量分析;;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析

;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;标准系列

;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;第二节定量分析;高效液相色谱分析;4.1概述;高速：HPLC采用高压输液设备，流速大增加，分析速度极快，只需数分钟；而经典方法靠重力加料，完成一次分析需时数小时。;高压:压力达150-300kg/cm2

高速:分析速度与GC相当

高效:柱效高，N=10000

高灵敏度:10–9~10-11g/ml

操作方便

应用范围广;2.HPLC与GC的比较

分析对象及范围：GC分析只限于气体和低沸点的稳定化合物，而这些物质只点有机物总数的20%；HPLC可以分析高沸点、高分子量的稳定或不稳定化合物，这类物质占有机物总数的80%。

流动相的选择：GC采用的流动相中为有限的几种“惰性”气体，只起运载作用，对组分作用小；HPLC采用的流动相为液体或各种液体的混合，可供选择的机会多。它除了起运载作用外，还可与组分作用，并与固定相对组分的作用产生竞争，即流动相对分离的贡献很大，可通过溶剂来控制和改进分离。

操作温度：GC需高温；HPLC通常在室温下进行。

;结论：从色谱分析的发展来看，HPLC比GC更为有用、更具发展前途！;3.应用

由于HPLC分离分析的高灵敏度、定量的准确性、适于非挥发性和热不稳定组分的分析，因此，在工业、科学研究，尤其是在生物学和医学等方面应用极为广泛。如氨基酸、蛋白质、核酸、烃、碳水化合物、药品、多糖、高聚物、农药、抗生素、胆固醇、金属有机物等分析，大多是通过HPLC来完成的。

下图是各种HPLC方法的应用范围及对象;;4.2液相色谱仪器

highperformanceliquidchromatograph;液相色谱仪（2）;液相色谱仪（3）;液相色谱仪（4）;高压输液装置;

进样系统;

分离系统;

检测系统;

配有梯度淋洗、自动进样和数据处理装置。

;其工作过程如图所示。;;流