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高效液相色谱法
HighPerformanceLiquidChromatography; 11.1基本概念和术语
以液体为流动相的色谱法称为液相色谱。高效能固体细微粒为固定相，高压溶剂为流动相，配备高灵敏度检测器的液相色谱为高效液相色谱。
术语：
A、被分离组份，被分离物质，溶质
B、流动相，溶剂，洗脱剂
C、固定相包括：载体（担体）、涂层
D、流出液、洗出液;11.2分类和特点
分类：
分配色谱：经典液液分配色谱
化学键合相色谱（分配+吸附）
极性键合相色谱
非极性键合相色谱 （反相化学键合相、离子对色谱）
*聚合物基底的反相色谱;11.2分类和特点
分类：
吸附色谱
离子交换色谱
阳离子交换色谱
阴离子交换色谱
离子色谱
分子排阻色谱
凝胶过滤色谱
凝胶渗透色谱;特点：
与经典LC比，快速、高效、高灵敏度
与GC比，慢速，但可分离难气化物质
A.高压：150-300Kg/cm2
B.高速：1-10mL/min
C.高效：?5000塔板/m
D.采用高灵敏度检测器;11.3反相色谱
11.3.1保留和分离机理
以非极性键合或聚合物基底固定相为固定相，以极性溶剂为流动相，利用被分离组份在两相中的分配差异和在固定相上吸附的差异，使之彼此分离。
?;11.3.2固定相
以硅胶为基底的硅氧烷：C18、ODS、octadecylsilane
以聚合物为基底：PSDVB
?
11.3.3流动相
乙腈、甲醇、乙醇、水（缓冲液）
?
11.3.4流出次序
极性大的先流出，基团小的先流出;11.4离子交换色谱
11.4.1保留和分离机理
以离子交换剂为固定相，借助于试样中电离组份对固定在交换剂基体上带相反电荷的离解部位亲合力的不同，使其彼此分离。
;11.4.2固定相
交联聚苯乙烯为基体的离子交换树脂
硅胶为基体的键合离子交换剂
强酸型、弱酸型、强碱型、弱碱型
?;11.4.3流动相
电解质溶液
缓冲液
参见经典离子交换色谱
11.4.4流出次序
与溶质有效电荷、原子序、二次平衡有关
M2++4Cl- MCl42-
Cu2++4Cl- MCu42-;11.5HPLC仪器结构示意图;11.5.1贮液器?
11.5.2输液泵
A、恒压泵：气体压活塞、气体直接压液面
B、恒流泵：螺旋注射泵、往复式柱塞泵?
11.5.3梯度淋洗装置
低压梯度装置：混合后进高压泵
高压梯度装置：进高压泵后再混合?
11.5.4进样装置
进样阀;六通阀进样示意图;11.5.5色谱柱
柱管材料：耐腐蚀耐压
内径：2.0、3.0、4.1、4.6mm
长度：5、10、15、25cm等
固定相：颗粒细、圆、均一、刚性强
?
11.5.6控温系统;11.5.7检测器
要求：高灵敏、快响应、宽线性、低噪音、小体积
类型：
A、通用检测器：紫外-可见（UV-VIS）、示差折光、电导
B、选择性检测器：荧光、电化学（安培、库仑）
C、特效检测器：火焰原子吸收、等离子体发射光谱、质谱
11.5.8数据采集和处理系统;11.6实验技术
11.6.1除气：真空脱气、吹氦脱气、超声波脱气?
11.6.2装柱：干法装柱、湿法装柱?
11.6.3衍生技术：柱前衍生、柱后衍生?
11.6.4接口;11.6.5条件选择
A、流动相流速
B、流动相组成
C、固定相
D、分析温度;11.6.6梯度洗涤技术
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