蛋白质的提取.ppt

⑤拆卸蒸馏装置：⑥分离油层：蒸馏完毕，应先撤出热源，然后停止通水，最后拆卸蒸馏装置，拆卸的顺序与安装时相反。收集锥形瓶中的乳浊液，向锥形瓶中加入质量浓度为0.1g／mL的NaCl，然后将其倒入分液漏斗中，用分液漏斗将油层和水完全分开。放出玫瑰精油，用接收瓶收集。⑦除去水分：向接收瓶加入无水Na2S04，24h后过滤，得到玫瑰油。注意事项：蒸馏时间不能过短，温度不能过高。第64页,共72页，星期六，2024年，5月鲜玫瑰花+清水水蒸气蒸馏油水混合物油水分离除水玫瑰油加无水Na2SO4加NaCl氯化钠：促使油水混合物（乳浊液中油和水的分离。无水硫酸钠：吸收油层中的水分。实验流程示意图：第65页,共72页，星期六，2024年，5月压榨装置通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油实验原理：实验装置：二、橘皮精油的提取：提取方法：压榨法第66页,共72页，星期六，2024年，5月实验步骤：①橘皮的处理：在实验前一天，将新鲜橘皮用清水清洗沥干。②石灰水浸泡：用pH大于12、质量分数为7％～8％石灰水浸泡橘皮16～24h。③清水漂洗：浸泡好的橘皮用流水彻底漂洗干净，沥干。第67页,共72页，星期六，2024年，5月④粉碎和压榨：将橘皮粉碎，加入相当于橘皮质量0.25％的NaHCO3和5％的Na2S04，并调节pH为7～8。用家用榨汁机或手动压榨机得到压榨液。⑤过滤压榨液：将压榨液先用普通布袋过滤除去固体物和残渣，再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮油分离出来。第68页,共72页，星期六，2024年，5月⑥静置处理：将橘皮油在5～10℃冰箱中静置5～7d，使杂质沉淀，分离出上层澄清橘皮油。分析：静置处理目的：除去果蜡和水分。⑦再次过滤：将下层橘皮油用滤纸过滤，滤液与上层橘皮油合并，得到橘皮精油。第69页,共72页，星期六，2024年，5月静置漂洗压榨过滤石灰水浸泡再次过滤橘皮油提取橘皮精油的实验流程示意图：石灰水：防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液黏稠度，过滤不堵塞筛眼。小苏打、硫酸钠：促进油和水的分离（用量分别为橘皮质量的0.25％和5％）。第70页,共72页，星期六，2024年，5月结果分析与评价：你是否提取出了玫瑰精油或橘皮精油？你能描述提取出的精油的特点吗？从颜色、气味等方面来评价所提取的精油的纯度和质量。玫瑰精油为浅黄色至黄色的液体，并带有甜韵的玫瑰香；橘皮精油为无色透明的液体，具有诱人的橘香味。第71页,共72页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第72页,共72页，星期六，2024年，5月【实验原理】

2.影响电泳的因素：内在因素：蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和形状外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象第32页,共72页，星期六，2024年，5月影响蛋白质分子运动速度的因素?决定运动方向电场作用力形成阻力决定运动速率电荷性质电荷量分子形状分子大小√√√√√√√第33页,共72页，星期六，2024年，5月3.醋酸纤维素溶于有机溶剂（如：丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）后，涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。该膜具有均一的泡沫状的结构，厚度约为120μm，有很强的通透性，对分子移动阻力很小。该薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高，对样品无拖尾和吸附现象等优点第34页,共72页，星期六，2024年，5月血清蛋白参考值等电点分子量（kDa）占总蛋白的百分数(%)清蛋白4.646961~71α1球蛋白5.062003~4α2球蛋白5.063006~10β球蛋白5.1290~1507~11γ球蛋白6.85156~9509~18第35页,共72页，星期六，2024年，5月4.经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带，从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白，经染色可计算出各蛋白质的百分含量。第36页,共72页，星期六，2024年，5月【实验器材】1.DYY-6C型?双稳定时电泳仪和DYY-Ⅲ型电泳槽2.醋酸纤维薄膜（2cm×8cm）：1片/人。3.培养皿：一排桌子公用5套，包括平衡、染色各用一套，漂洗用3套。4.点样器：载玻片。5.滤纸：公用。6.镊子：一个/组。第37页,共72页，星期六，2024年，5月【实验试剂】1、巴比妥-巴比妥钠缓冲