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甲状腺肿瘤患者血清中MBL的表达及意义
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【摘要】目的检测甲状腺肿瘤患者血清中甘露糖结合凝集素（MBL）的水平并探讨其意义。方法应用ELISA法检测26例甲状腺乳头状癌、30例甲状腺腺瘤患者MBL的血清水平。结果甲状腺乳头状癌患者MBL血清含量高于甲状腺腺瘤患者及健康者，甲状腺乳头状癌患者与甲状腺腺瘤患者及健康者间差异有统计学意义（P＜0.05），甲状腺腺瘤患者与健康者间差异无统计学意义（P＞0.05）；甲状腺腺瘤患者与健康者间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论MBL在甲状腺乳头状癌患者中血清水平高，说明作为免疫防御分子，可能参与了甲状腺肿瘤的免疫防御过程。
【关键词】：甲状腺肿瘤；甘露糖结合凝集素；MBL；检测
甘露聚糖结合凝集素（MBL）作为天然免疫系统的关键分子，是由肝脏合成的悦型凝集素超家族成员中胶凝素家族成员，通过结合MBL相关的丝氨酸蛋白酶（MBL，MASP）激活补体凝集素途径和胶原样区域参与免疫调理，与各种感染、自身免疫学疾病、反复流产以及纤维囊性病等关系密切。最近的研究发现MBL与肿瘤密切相关。本研究应用酶联免疫吸附法探讨其在甲状腺肿瘤中的表达水平及其临床意义，为甲状腺癌的诊断、鉴别诊断提供客观的依据。
1资料与方法
1.1一般资料
本研究收集的血清为本医院2018年5月至2019年7月甲状腺乳头状癌26例男8例，女18例，年龄26~57岁)，甲状腺腺瘤30例(男12例，女18例，年龄25~70岁)，26例健康献血者(男14例，女12例，年龄18~63岁)作为对照组，均于清晨抽取空腹静脉血，EDTA2K2抗凝血2mL，分离血清后-70℃冻存待测。每例均有详细的临床资料，全部病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史。甲状腺肿瘤患者均术后经病理科经验医师证实。
1.2主要试剂及方法
用ELISA法检测MBL和MASP-2水平，HUMANMBI(MASP-2)ELISA试剂盒购于上海沪峰生物工程有限公司。所有血清标本溶解并恢复至室温，3500r/min离心5min，取上清液2μL，具体操作步骤严格按说明书操作，用酶标仪比色，波长为450mm，每批标本浓度分别为0、1、2、5、10、2550和100ng/mL，根据测得吸光度(OD)值，换算出血浆MBL和MASP-2的浓度。
1.3统计学方法用
SPSS23.0统计软件，对所测结果进行正态性检验。两组之间采用t检验进行均数比较。
2结果
MBL和MASP-2的血清浓度在对照组、甲状腺腺瘤组、甲状腺乳头状癌组中呈递增趋势，甲状腺乳头状癌组与甲状腺腺瘤组、对照组之间的差异有统计学意义(P0.01);甲状腺腺瘤组与对照组之间的差异无统计学意义(P0.05)。见表1。
表1MBL和MASP-2在甲状腺肿瘤患者血清中的水平
组别
例数
MBL
MASP-2
甲状腺乳头状癌组
26
565.33±76.70
726.15±78.68
甲状腺腺瘤组
30
324.27±24.74
379.27±30.26
对照组
26
152.69±16.95
203.85±29.09
3讨论
人类MBL基因定位于10号染色体长臂(10q12q21)，有2种MBL基因，MBL-1假基因和MBL-2功能基因，由4个外显子组成。在2个位置易出现变异为MBL的第一外显子区域，另一为MBL的启动子区域。MBL浓度主要由MBL基因多态性决定，不同的MBL基因型、单倍型个体，其血清MBL水平不同，可导致血清MBL水平低下，随时可感染各种疾病。已有研究证明:恶性肿瘤等患者MBL基因突变频率增加。这些突变导致不能形成足够的MBL四聚体与MASP结合，发挥其补体激活等效用。MASP-2是天然免疫系统中的重要组分，在补体激活的凝集素途径中发挥关重要的作用。MBL或Ficolin通过CRD识别并结合病原微生物表面的甘露糖、岩藻糖及N-乙酰葡萄糖等结构，激活与之相连的MASP-2，活化的MASP-2能以类似C1的方式依次裂解C4和C2，形成C3转化酶C…)进而激活后续的补体成分。现已证实它至少有以下4种功能:激活补体、促进调理吞噬、调节炎症应及促进凋亡1。已有研究表明，MASP-2基因突及其血清含量的变化与感染性疾病、自身免疫性疾病及肿瘤等多种疾病密切相关。本研究通过ELISA方法检测MBL和MASP-2在甲状腺肿瘤患者血清中的水平，结果显示对照组、甲状腺腺瘤组和甲状腺乳头状癌组呈递増趋势。甲状腺乳头状癌组、甲状腺腺瘤组与对照组之间的差异有统计学意义(P0.01)，甲状腺腺瘤组与对照组之间的差异无统计学意义(P0.05)。在急性髓样白血病患者和另外一项研究儿童恶性肿瘤患者中同样监测到MBL血清浓度高。SWIERZKO等在研究MB
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