果树茎尖超低温脱毒研究进展-超低温保存.docxVIP

?

?

果树茎尖超低温脱毒研究进展

超低温保存-论文网

?

?

论文摘要：果树病毒病害一直是制约果树生产持续发展的重要因素。采用无毒种苗是防控果树病毒病害的有效途径之一。脱毒技术是生产无毒苗的核心技术。茎尖超低温脱毒是近年来建立的一种新的脱毒技术。到目前为止，该技术已成功地用于脱除包括李(Prunus)、香蕉(Musa)、葡萄(Vitisvinifera)、草莓(Fragariaglandiglora)和树莓(Rubusidaeus)等果树的6种病毒和柑桔黄龙病（HLB，一种细菌性病害）。与传统的脱毒方法相比较，茎尖超低温脱毒具有脱毒率高、脱毒率不受茎尖大小及超低温处理方法的影响、脱毒苗生产周期短等优点。更重要的是，茎尖超低温处理可同时实现脱毒与植物种质资源长期保存的双重目标。与传统的脱毒方法一样，基因型特异性强是限制该技术广泛应用的关键因素。本文全面介绍了果树茎尖超低温脱毒研究的发展与现状，并讨论了茎尖超低温脱毒的机理，旨在进一步推动果树茎尖超低温脱毒的研究和应用。

论文关键词：超低温脱毒,超低温保存,果树,茎尖,无毒

果树病毒病害一直是制约果树生产持续发展的重要因素。果树被病毒感染后，常表现出营养生长减弱,生长势降低，生理代谢减弱，产量和品质明显下降。严重时,造成果树毁灭性危害。比较带毒苗和无毒苗对营养生长的影响研究表明：苹果茎沟病毒(ASGV)对早酥梨(Pyruspyrifolia)幼树生长有明显的影响，带毒苗的株高、干径和分枝数较无毒苗分别降低13%，11%和51%，而秋季落叶率增长11.4%。王际轩等研究了苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)，苹果茎沟槽病毒(ASGV)和苹果茎痘病毒(ASPV)对苹果产量的影响，结果表明，金矮生、富士和甜黄魁带毒苗的产量分别比对照下降35.4%、31.1%和29.4%。李痘包病毒(PPV)可导致产量降低高达52.94%。必威体育精装版的研究表明，葡萄扇叶病毒(GFLV)导致“Callet”葡萄产量下降20%以上，而葡萄卷叶病毒(GLRaV-1)可导致“MantoNegro”葡萄减产高达40%以上。带毒苗对果实的维生素C、总糖、总酸及果皮中花青苷也有明显影响。上世纪40年代巴西圣保罗爆发的柑桔衰退病(Citrustristezavirus,CTV)对该地区的柑桔业造成了毁灭性危害。

在果树生产上，采用无毒种苗是防控果树病毒病害的有效途径之一。栽培无毒苗能明显促进果树营养生长与幼苗早结果，提高产量与品质。脱毒技术是生产无毒苗的核心技术。因此，建立高效、简易的脱毒技术无疑具有重要的研究价值和实践应用意义。

果树传统的脱毒技术包括茎尖培养、热处理、热处理结合茎尖培养和微型嫁接等。茎尖培养对茎尖大小要求十分严格，茎尖过大难以脱毒；而茎尖过小则难以再生完整植株。热处理脱毒费工、费时，并且对耐热性较强的病毒和耐热性较差的植物的应用受到限制。微型嫁接程序复杂，生产周期长。

超低温保存(Cryopreservation)是将植物的离体材料如茎尖、细胞等置于液氮中(-196℃)保存的一种技术。在液氮条件下，细胞的分裂活动和生理代谢停止。因此，植物离体材料可以无限期保存，并且保持其遗传稳定性。因此，超低温保存被视为植物种质资源长期保存最理想、最有效的方法。自1960年日本的Sakai博士首次报道植物离体材料超低温成功保存以来，该方法已在包括大田作物和园艺植物、草木和木本植物、温带和热带植物上都有成功的报道。茎尖超低温疗法(Cryotherapyofshoottips)是将茎尖置于液氮中进行短暂处理，脱除病毒的方法。到目前为止，该技术已成功地用于脱除包括李(Prunus)、香蕉(Musa)、葡萄(Vitisvinifera)、草莓(Fragariaglandiglora)和树莓(Rubusidaeus)等果树的6种病毒及柑桔黄龙病(HLB,一种细菌性病害)。茎尖超低温脱毒被认为是脱除植物病毒最有效的方法,为脱毒苗生产开辟了一条崭新的途径。更重要的是，茎尖超低温处理可以同时实现植物种质资源的长期保存与脱除植物病毒双重目标。

本文全面地介绍了果树茎尖超低温脱毒的所有案例，讨论了茎尖超低温脱毒的机理，与传统脱毒方法进行了比较。旨在进一步推动果树茎尖超低温脱毒的研究与应用。

1果树茎尖超低温脱毒案例介绍

1.1李痘包病毒(Plumpoxvirus,PPV)

李痘包病毒(PlumpoxPotyvirus,PPV)，是引起李属(Prunus)植物最严重病害Sharka病的病原。PPV可同时感染桃(Prunuspersicae),李(P.domestica),扁桃(P.armeniaca),油桃(P.persicavar.nectarina),杏(P.amygdalus),甜樱桃(P.avium)和酸樱桃(P.ce