亚抑菌浓度鱼腥草素钠及与红霉素联合对表皮葡萄球菌生物被膜的作用.pdf

亚抑菌浓度鱼腥草素钠及与红霉素联合对表皮葡萄球菌生物被膜的

作用

目的：观察亚抑菌浓度（亚-MIC）的鱼腥草素钠及与红霉素联用对表皮葡

萄球菌生物被膜的影响。方法：连续稀释法测定鱼腥草素钠和红霉素对表皮葡萄

球菌的MIC；棋盘格法测定鱼腥草素钠和红霉素联用对表皮葡萄球菌悬浮菌的

作用；体外构建表皮葡萄球菌生物被膜，XTT递减法评价亚抑菌浓度的鱼腥草

素钠及与红霉素联用对表皮葡萄球菌黏附及对生物被膜内细菌代谢的影响；扫描

电镜观察亚抑菌浓度下2药单独及联合用药后对表皮葡萄球菌生物被膜形态的

影响情况。结果：鱼腥草素钠、红霉素对表皮葡萄球菌的MIC分别为62.5，7.812

5mg·L-1；1/8MIC鱼腥草素钠、1/2MIC红霉素联用对表皮葡萄球菌悬浮菌的作

用为协同，亚抑菌浓度的鱼腥草素钠、红霉素以及二者联用对表皮葡萄球菌生物

被膜菌黏附和代谢均有抑制作用，对表皮葡萄球菌生物被膜的形态有影响。结论：

亚抑菌浓度的鱼腥草素钠、红霉素对表皮葡萄球菌生物被膜有抑制作用；鱼腥草

素钠和红霉素联合用药对表皮葡萄球菌悬浮菌和生物被膜的抑制具有协同作用，

在对生物被膜菌代谢的抑制和对生物被膜形态的影响方面效果尤为显著。

标签：表皮葡萄球菌；生物被膜；鱼腥草素钠；红霉素；亚抑菌浓度；药物

协同

表皮葡萄球菌是寄居在人体皮肤和黏膜的正常菌群，但随着各种侵入性操

作、人工假体使用的增多，其引发的生物被膜的相关感染在不断的增加，成为引

起医院内感染菌血症的主要致病菌之一，其致病机制主要是附着于植入体内的人

工材料表面产生生物被膜（biofilm）。细菌生物被膜（bacterialbiofilm）是附着于

隋性或活性实体表面的细菌以及由细菌分泌的含水聚合性基质组成的结构性细

菌群落。细菌形成生物被膜后不仅难以去除，而且其引发的感染常常难以治疗；

因此近些年对生物被膜的研究已成为热点[1]。包被有生物被膜的细菌称为被膜

菌，被膜菌无论其形态结构、生理生化特性、致病性还是对环境因子的敏感性等

都与浮游细菌有显著的不同，其对抗生素的耐药性比浮游菌增加10～1000倍

[2]，从而导致严重的临床问题，引起许多慢性和难治性感染疾病的反复发作。

本文以表皮葡萄球菌生物被膜为对象，从生物被膜及表皮葡萄球菌的生物学特征

出发，探讨中药有效成分鱼腥草素钠与红霉素联合对表皮葡萄球菌生物被膜的作

用。试验旨在通过在体外建立表皮葡萄球菌生物被膜模型，观察亚抑菌浓度的鱼

腥草素钠及其联合红霉素后对表皮葡萄球菌生物被膜的影响；最终为中药及中西

药联用治疗表皮葡萄球菌引起的相关感染提供研究依据和实践参考。

1材料

1.1菌株与培养基表皮葡萄球菌标准菌株ATCC35984（强产膜株），购于中

国食品药品检定研究院。营养琼脂（青岛高科园海博生物技术有限公司，批号；MH（A）培养基（北京奥博星生物技术有限公司，批号）；

MH（B）培养基（北京奥博星生物技术有限公司，批号；营养肉汤（上

海广茂生化制品有限公司）；胰蛋白胨大豆肉汤培养基TSB（北京奥博星生物技

术有限公司，批号。

1.2药品与试剂红霉素标准品（中国食品药品检定研究院，批号

130307-200716）；鱼腥草素钠标准品（中国食品药品检定研究院，批号

100247-199601）。甲醇（上海中试化工总公司）；二甲基亚砜（天津市光复精细

化工研究所，批号201000115）；丙酮（上海苏懿化学试剂有限公司，批号；XTT（BIOBASICINC，批号YY1214BO16Y）；VK3（美国ALexis

公司，批号Loo443）；结晶紫染液、媒染液、磷酸盐缓冲液PBS、林格液、硝酸

银液（实验室自配），所用试剂均为国产分析纯。

1.3仪器96孔微量培养板（Corning公司）；StatFax2100酶标仪（西盟生命

技术国际公司）；CX21光学显微镜（日本Olympus公司）；Sirion200型扫描电镜

（FEI公司）；DPH-9162型电热恒温培养箱（上海一恒科技