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定点荧光标记蛋白：轻松搞定CAR-T阳性率

检测

CAR-T细胞疗法在8月份提前进入“丰收季”。8月27日NMPA官网公

示，国内第五款CAR-T细胞疗法——来自传奇生物的西达基奥仑赛注

射液获批上市。这款靶向BCMA的细胞疗法用于治疗复发或难治性多

发性骨髓瘤（R/RMM）成人患者。同一天，药明巨诺靶向CD19的瑞

基奥仑赛注射液新适应症上市申请获得批准，用于治疗成人复发或难

治性套细胞淋巴瘤（R/RMCL）。

与传统药物不同，CAR-T在静脉注射给药后会分布在各个器官。在CAR

与肿瘤靶点结合后，CAR-T细胞被激活并增殖，一般在2周内达到峰

值，之后根据个体差异呈现不同程度的下降趋势，因此CAR细胞阳性

率是CAR-T产品活性的关键指标之一。

CAR细胞阳性率检测贯穿CAR-T疗法始终，是其质量控制的“基石”。

在研发阶段，为确保CAR结构改进能最大化的提高缓解率，需要对

CAR阳性细胞的数量和比例进行检测。在CAR-T生产过程中的质量控

制、临床试验监测以及患者体内扩能和存活能力等各阶段均需检测细

胞活性。因此CAR-T细胞治疗产品从临床前研究到患者治疗后随访，

都需要CAR阳性率检测。

图源义翘讲堂《定点标记技术平台——专为细胞检测打造》讲座课件

选择合适的技术是构建CAR阳性率检测的基础。目前实验室常用的检

测技术有聚合酶链式反应（PCR）、流式细胞术（FCM）、抗独特型抗体

等。

流式细胞术（FCM）基于荧光标记，对细胞进行多参数、快速定量分

析及分选。FCM具有高通量快速分析优势，每秒可达10万个细胞，

并且分选纯度在99%以上。同时还能检测多种细胞信息，如细胞群的

比例、数量、T细胞功能、免疫分型、蛋白丰度等，进而判断特定细

胞类型及其蛋白丰度。

利用荧光标记蛋白与细胞表面重要标志物特异性结合的特性，进行流

式细胞术检测，是现阶段普遍公认的主流检测技术。然而，荧光标记

蛋白的选择面临诸多挑战。传统化学标记是主要的蛋白标记技术，但

批间一致性差，检测结果不稳定，影响对治疗效果的评估。此外，传

统化学标记蛋白易聚集，检测时可能产生非特异信号。因此，开发高

活性、高批间一致性的荧光标记蛋白对细胞检测尤为重要。

基于以上需求，义翘神州凭借其特色定点标记技术平台，成功开发了

一系列专为CAR细胞检测打造的定点标记蛋白产品，荧光标记类型多

样，涵盖PE、APC、AF488、AF647等，全方位满足不同研究需求，

如细胞药物质控和检测、抗体筛选、蛋白互作研究等。

义翘神州定点标记蛋白

义翘神州定点标记蛋白优势

★在某一特定氨基酸上标记

★在特定位置标记

★标记数量确定；

★保持天然构象和活性

★批内高度均质性

★批间高度一致性

详细验证数据

特异性灵敏度高（Cat#:11880-H08W1-SG）

AF647荧光定点标记CD19蛋白经FCM验证可高特异性检测CD19CAR

细胞。

Flowcytometricanalysisofanti-CD19CARexpression.293cellswere

lentivirallytransducedwithanti-CD19CAR.Flowcytometricanalysiswas

performedwithanegativecontrolproteinandAF647-conjugatedhumanCD19

protein(Cat#:11880-H08W1-SG),respectively.Non-transduced293cells

wereusedasacontrol(left)(QCtested).

非特异性背景低（Cat#:11880-H08W1-SG）

AF647荧光定点标记CD19蛋白经未转染CAR的PBMC细胞验证，无

特异性背景，保证CAR表达检测结果的特异性和准确性，适用于CAR

细胞阳性检测。

BindingactivityofAF647-conjugatedCD19protein(Cat#:11880-H08W1-SG)

toPBMCcells.PBMCcellswerestainedwithanti-CD3antibodyandAF

647-conjugatedhumanCD19proteinanddetectedbyflowcytometry.PBMC

cellsstainedwithanti-CD3an