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大蒜多糖用于化妆品的安全性评价及功效研究

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大蒜用于医药与卫生历史悠久，大蒜多糖是大蒜鳞茎提取物的主要成分之一，具有抗氧化、抗炎、抑菌等多种活性，有很高的开发价值。论文中对大蒜多糖的理化性质、刺激性、安全性进行测试，对其保湿性进行人体短期保湿功效评价，对其抗氧化性进行体外生化水平功效评价。结果表明，该提取工艺下的大蒜多糖不具有眼刺激性，安全性良好，并且具有良好的保湿性能与抗氧化活性，为大蒜多糖的提取及在化妆品中的开发利用提供了新的思路和一定的科学支撑。

大蒜（英文名称Garlic;拉丁名称AlliumsativumL.），为百合科（Liliaceae）葱属（Allium）植物的地下鳞茎，也可称为独蒜、胡蒜。其由于独特的风味和保健功效，数千年来，以无致敏性、无副作用、无毒性的独特优势被广泛用作常见的食用香料和药物l2l。现代医学已证实大蒜具有多种药理作用，如降血脂、保护肝功能、抗糖尿病，抗疲劳等。此前的化学成分调查表明，大蒜除合硫挥发物（大蒜素）外，还含有多糖、黄酮类化合物、简单酚类化合物等，其中大蒜多糖是大蒜中含量较高的活性成分之一，可达干重的80%。大蒜的药用保健作用也与大蒜多糖有很大关系。

大蒜鳞茎中含有丰富的蛋白质、低聚糖和多糖类，还有脂肪、矿物质等。大蒜多糖主要是从鳞茎中分离出来的，由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等了种单糖组成，具有很高的开发价值。近年来，临床研究表明，大蒜多糖是大蒜的主要功效成分，具有抗氧化、抑菌、抗炎、抗血凝、抗尿糖、抗肿瘤、抗衰老等生物活性，具有很高的研发价值。

对于大蒜多糖的结构和理化性质，目前国内外的研究较少。由于材料不同、提取方法不同，得到的大蒜多糖理化性质也有较大的差异。研究中对由晨光生物科技集团股份有限公司提供的大蒜多糖理化性质进行检测，依据《已使用化妆品原料目录（2021版）》中关于蒜（ALLIUMSATIVUM）鳞茎提取物的驻留类产品最高历史使用量确定了本研究中大蒜多糖的添加量为1%，通过红细胞溶血实验与人體斑贴实验对其进行刺激性与安全性评价，并综合评价了大蒜多糖的体外保湿性和抗氧化性，为大蒜多糖在化妆品领域的开发应用提供一定理论依据与技术支撑。

材料与方法

1.1材料与试剂

多糖含量为90%以上的大蒜多糖（由晨光生物科技集团股份有限公司提供），磷酸盐缓冲液（PBS），十二烷基硫酸钠（SDS），新鲜兔血（北京市海淀区兴隆实验动物养殖厂），1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH），无水乙醇，抗坏血酸（维生素C），三羟甲基氨基甲烷（Tris），盐酸，邻苯三酚（焦性没食子酸），基础面霜原料（PEG-100硬脂酸甘油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、甘油硬脂酸酯、液体石蜡、肉豆蔻酸异丙酯、聚二甲基硅氧烷、甘油、丁二醇、黄原胶、EDTA二钠、苯氧乙醇-乙基己基甘油、去离子水）。

1.2主要仪器

pH计（型号FE28，梅特勒一托利多仪器有限公司）、电导率仪（型号DDS-30TA，上海精密科学仪器有限公司）、台式冷冻离心机（型号Centrifuge5810R，Eppendorf）、酶标仪（型号InfiniteM200PRO，TECAN）、摇床（型号KYC-100C，上海福玛实验设备有限公司）、斑试器（北京百亿怡达科技开发有限公司）、皮肤水合测试仪（型号CorneometerCM825，德国CK）、皮肤水散测试仪（型号TewameterTM300，德国CK）、分析天平（型号ME204/02，梅特勒-托利多仪器）、水浴锅（型号HHS，上海博讯实业有限公司医疗设备厂）。

1.3试验方法

1.3.1理化性质检测

利用pH计检测大蒜多糖提取物（浓度为10mg/mL）的pH值。利用电导率仪检测大蒜多糖提取物（浓度为10mg/mL）的电导率值。

1.3.2红细胞溶血试验

根据田妮娜等人的方法采用红细胞溶血实验对大蒜多糖的眼刺激性进行了测试评价，并稍作修改。大蒜多糖配置六个梯度浓度溶液：20mg/mL、15mg/mL、10mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL。各浓度梯度样品溶液与RBC悬液按975μL样品+25μLRBC混匀。将不同浓度大蒜多糖溶液一RBC混合液在室温下180r/min孵育1h。将各EP管置于离心机中，10000r/min速度离心min，终止孵育。用酶标仪测量其在540nm处的OD值。每个浓度在96孔板中点三个平行，结果取平均值。

阴性对照（零溶血）：975μLPBS+25μLRBC，设阴性对照的溶血率为0%。

阳性对照（完全溶血）：975μL超纯水+25μLRBC，设阳性对照的溶血率为100%。

1.3.3人体皮肤斑贴试验

1.3.3.1制备1%大蒜多糖的面