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化学发光免疫法与酶联免疫法检测血清AFP的对比分析
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摘要:目的:探讨分析检测血清AFP时使用化学发光免疫法与酶联免疫法检测的效果。方法:回顾性分析2017年1月-2018年12月我院收治的80例患者的血清样本,数字法进行随机抽取,各抽40例,设为研究和对照两组,用化学发光免疫法的为研究组,用酶联免疫法的为对照组,分析两组检测回收率和批内批间的灵敏度CV值。结果:研究组回收率比对照组好(P<0.05),灵敏度CV值比对照组优(P<0.05)。结论:检测血清AFP时使用化学发光免疫法回收率较高,灵敏度高,准确性更好,相对于酶联免疫法具有较高的准确性和精密度,因此具有临床应用的价值。
关键词:血清AFP;化学发光免疫法;酶联免疫法;回收率;灵敏度CV值
血清甲胎蛋白(AFP)是胎儿的肝细胞分泌的正常成分,研究发现肝癌细胞能合成血清甲胎蛋白,因此,原发性肝癌病人血清中,血清甲胎蛋白明显升高,肝癌阳性率可达90%左右[1]。所以检测血清中的AFP水平,可以对肝脏疾病等进行诊断,因此提高诊断的准确率具有重要的意义。临床上常用的检测方法为化学发光免疫法和酶联免疫法。本研究分析检测血清AFP时使用化学发光免疫法与酶联免疫法检测的效果。
1、一般资料
1.1基本资料
回顾性分析2017年1月-2018年12月我院收治的80例患者的血清样本,数字法进行随机抽取,各抽40例,设为研究和对照两组,研究组年龄10-80岁,平均年龄(42.56±11.55)岁,21例男性,19例女性;对照组年龄10-80岁,平均年龄(43.04±11.72)岁,24例男性,16例女性。两组患者在年龄、性别上均可比(P>0.05),患者或者家属均已签署知情同意书,获得伦理委员会批准,纳入标准:均配合本次研究。排除标准:凝血造血功能障碍,器官功能障碍,恶性肿瘤,精神性疾病,黄疸、溶血、脂血,无法配合本次研究。
1.2研究方法
采集所有患者的新鲜血液,要求采集前空腹8h以上,并采集凌晨7-9点的新鲜血液,采集时不使用含有抗凝剂的采血管,采集后立即进行离心,分离血清。
对照组为酶联免疫法:使用AFP酶联免疫法试剂盒,严格按照试剂盒内的操作说明进行操作,按照下表进行添加样品,配置标准品。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。根据读数计算浓度。
研究组为化学发光免疫法:用异鲁米诺作为发光底物,利用AFP抗体与标本中AFP抗原进行相结合,随后结合物与液相中被异鲁米诺标记的多克隆AFP抗体相结合,通过全自动化学发光仪测定数据,对数进行分析。
回收率计算:回收实验分别取浓度为18.6ng/ml、26.7ng/ml和35.3ng/ml的混合血清加入不同浓度有定值血清中,进行回收率检测,求出平均回收率[2]。
1.3观察指标
分析两组回收率和批内批间的灵敏度CV值。
1.4统计学处理
实验数据均用?x±s表示,t检验,P<0.05为试验有统计学差异。
2.结果
2.1两组回收率比较
研究组回收率(97.56±5.62)%高于对照组(P<0.05),见表1。
表1两组回收率比较(n=40,?x±s)
组别
回收率(%)
研究组
97.56±5.62
对照组
90.02±4.51
t
6.6178
P
0.0000
2.2两组灵敏度CV值比较
研究组批内、批间CV值均低于对照组(P<0.05),见表2。
表2两组灵敏度CV值比较(n=40,?x±s)
组别
批内(%)
批间(%)
低值
中值
高值
低值
中值
高值
研究组
3.64
2.75
3.18
3.25
3.14
4.29
对照组
6.05
5.33
5.05
6.41
5.52
5.18
3.讨论
由于社会老龄化、饮食结构改变、熬夜、遗传、肥胖、病毒感染等各种因素,导致肝病、肝癌等疾病的发病率越来越高,严重影响患者的肢体功能和生活质量。早发现早治疗是疾病的治疗宗旨。血清甲胎蛋白(AFP)在正常人中表达较低,只有存在疾病时其水平会上升,因此检测血清中的AFP对于肝癌诊断具有重要的意义。
肝病患者AFP>750ng/ml或者无肝病的患者AFP>400ng/ml可提示为肿瘤[3]。因此对于AFP的诊断具有重要的意义。本次研究,对比化学发光免疫法与酶联免疫法两种方法,化学发光免疫法的灵敏度和回收率均较高。化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术[4]。相比于酶联免疫法具
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