pcr实验室设计的基本原则及建设要求.pdfVIP

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能将微量的DNA大幅增加，是分子生物学研究和实验的常规方

法，PCR实验室广泛应用于生物学各个领域，例如：艾滋病检测，

乙型肝炎，禽疫病，癌基因的检测和诊断，DNA指纹，个体识别，

亲子鉴定及法医物证等等,今天为大家进行详解。

一.PCR实验室布局

PCR实验室原则上为试剂准备区，样品制备区，扩增区和扩增产

物分析区四个单独的工作区域，并设有专用走廊，各工作区域应设缓

冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔

独立的，各工作区有明显的标志，不能直通，如果紧密连接，需安装

物品传递窗。前两区为扩增前区，后两区为扩增后区，即从：试剂准

备区——样品制备区——PCR扩增室——产物分析室，不得逆向流

动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区，不得逆向流动。各

工作区顶部应该安装紫外灯，紫外灯波长为254mm,每20㎡一支40W

的紫外灯。

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二.实验室各区功能及主要设备

1.试剂准备区：主要进行试剂的制备，分装和主反应混合液的

制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。试剂原材料

必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有

天平，冰箱，离心机，加样器，振荡器等。对于气流压力的控制，本

区并没有严格的要求，一般为+10Pa。

2.样品制备区：主要进行样品的保存，核酸提取，贮存及其加

入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱，生物安全

柜，离心机，加样器，振荡器等。本区的压力梯度要求为：相对于邻

近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染，一般为

+10Pa。

3.扩增区：主要进行DNA扩增。此外，已制备的DNA模板（来

自样品制备区）的加入和主反应混合液（来自试剂准备区）制备成反

应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有：扩增仪，冰箱，离

心机，加样器等。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，

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以避免气溶从本区漏出一般为-25Pa。

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4.扩增产物分析区：扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪，

洗板机.加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为：相对于邻近

区域为负压，一般为-25Pa，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域

三.PCR实验室通风系统及压力控制

各区域之间应具备单间的实验工艺流，物流，人流与气流，形成

单向流程的保护屏障，避免实验室之间的相互干扰，防止气溶胶扩散

对实验过程造成污染。

PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域交

叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式，严格控制送，排

风的比例以保证个实验区的压力要求。

四.PCR实验室装饰

实验室围护结构应牢固，气密性好；所有阴阳角宜采用圆弧过度；

墙体内壁光洁，不积尘，耐腐蚀，易清洗消毒；地面使用PVC卷材或

环氧树脂自流坪，材料应满足无缝隙，无渗漏，光洁，耐腐蚀的要求。

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五.PCR实验室注意事项

1.几个区域的大小设置情况，试剂准备区，扩增区，扩增产物分

析区，空间可以相对小一些，样品制备区要放置生物安全柜和低温冰

箱，空间应大一些。

2.试剂准备区，样品制备区设紧急洗眼器，以保证操作人员的安

全。

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