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Westernblot一抗和

二抗的选择

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Westernblot一抗和二抗的选择

抗体分类：根据重链恒定区的血清学类型，可将抗体分为IgM，IgG，IgA，IgD，IgE

五类，它们的重链分别为mu,gamma,alpha,delta,epsilon链。在上述每一类别中，按重链

构造上的变异又可分为几个亚类，例如人的IgG可分为IgG1，IgG2，IgG3，IgG4四个亚

类。轻链分为两种类型，kappa链和lambda链，但每种抗体中只存在一种类型的轻

链。二抗：二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体，上面通常连有

酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛，如

westernblot（通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质），ELISA（以耦联有酶的抗体或抗原

为标记来检测特异性的蛋白质，尤其是相应的抗原或抗体），免疫组织化学（检测组织中

的特异性抗原），免疫细胞化学（通过免疫学方法检测细胞的抗原组成），流式细胞术

（通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞）及免疫沉淀（通过抗原与抗体的

特异性结合作用来分离相应抗原）。二抗针对某一特定物种（如小鼠）的所有抗体均具有

特异性，因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记，大大节省了时间和费用；

此外，一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，从而使信号大大增强，提高了实验灵敏

度。

二，如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗

广义上是指专门和进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选

择不同的二抗，**捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶

蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择

二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需

要从下面几个方面考虑：【一抗的种属来源】

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，

二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备

的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应

的抗该物种的二抗。**捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗，包括抗小鼠、大

鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。【一抗的类别亚型】

二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是

IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常

会在产品说明书中都会有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小

鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几

乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例

如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验

中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。**捷能为

您提供通用的IgG（H+L）二抗，或者特异性只结合IgM的AntiIgM（mu）Antibody、

IgA的AntiIgA（alpha-Antibo