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微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程--第1页
微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程
1.概述
致病性大肠埃希菌包括肠产毒型大肠埃希菌、肠致病型
大肠埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌和
肠凝聚型大肠埃希菌5群。与普通大肠埃希菌的生化反应相
似,应结合血清反应(O、H和K抗原)、毒性试验(ST和
LT肠毒素)和临床症状,分别鉴定5型致病性大肠埃希菌。
2.标本类型
粪便标本。
3.鉴定
3.1形态染色与一般大肠埃希菌相同。
3.2培养特性在麦康凯琼脂平板上形成不透明、粉红
色或无色菌落。
3.3生化反应与普通大肠埃希菌相似。
3.4鉴别要点在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌
落。IMViC++--,
3.5不发酵或迟发酵山梨醇,为本菌的主要特征。
3.6操作步骤
3.6.1氧化酶试验参见氧化酶试验标准操作规程。
3.6.2致病型大肠埃希菌的鉴定
肠致病型大肠埃希菌(EPEC)婴幼儿水样或蛋花汤样
便,鉴定为大肠埃希菌后用EPEC分型血清作O:H分型。
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微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程--第2页
肠产毒型大肠埃希菌(ETEC)水样便,鉴定为大肠
埃希菌后需要测定ST和LT两种肠毒素及血清分型。ST的
检查可用兔肠段结扎试验,免疫学或分子生物学方法(DNA
探针)检测。
肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)细菌性痢疾样便,生化
特性与志贺菌相似,不发酵或迟发酵乳糖,赖氨酸脱羧酶阴
性,无动力,符合EIECO:H血清分型,豚鼠眼结膜试验、
HELA细胞侵入试验阳性。
肠出血型大肠埃希菌(EHEC)早期为水样便后为血
便,有50多个血清型,最具代表性的是O157:H7不发酵或
迟发酵山梨醇,在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌落,
可用EHECO:H诊断血清进行分型。
4.药敏
参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI
M100-S20必威体育精装版版本文件。
5.质量控制
参见质量管理程序。
6.检验结果解释与分析
疑似致病性大肠埃希菌感染,分离菌应先鉴定为大肠埃
希菌,再通过不同的方法鉴定到种型,如分离到上述4种腹
泻病原菌,应立即向临床发出报告。
7.临床意义
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微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程--第3页
7.1EHEC主要引起严重的出血性肠炎,临床表现为低
热、痉挛性腹痛,开始水样便,继而血样便。
7.2EPEC主要引起婴儿腹泻,伴有低热、呕吐和腹泻,
黏液便不带血。轻
者不用抗生素治疗,严重者需用抗生素治疗。
7.3ETCC引起旅游者和婴幼儿腹泻的主要病原菌,临
床表现为水样腹泻、恶心、呕吐、寒战,有时发生脱水及中
毒症状。轻者不用抗生素治疗,严重者需用抗生素治疗。
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