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选择性模块化自主研究式学习Mini-ElectiveExperimentalModulesLearning
北京大学基础医学院免疫学系
免疫学课程安排
药学:实验课程开始(12月16日,病理楼3层实验室)
护理与药学:实验课程开始(12月16日,病理楼3层实验室)
实验课程——选择性模块化自主研究式学习(10分,另有加分)
实验课汇报(12月25日上午,地点理论课的教室)
目的
提高学生的自主研究能力。免疫学是建立在实验基础上的科学,免疫实验教学是衡量免疫教学水平的重要标志,也是培养医学生研究能力和动手能力的重要方面,进行模块化实验教学改革的主要目的是促进学生自主研究和提高动手解决问题的能力
降低实验教学成本。由于实验材料成本价格上涨迅速,教学经费提高却不明显,实验教学处于亏损的状态,进行模块化教学,探索降低教学成本的方法。
保证教学内容不减少。在进行模块化教学改革前,我们进行了充分的调研,发现由于教学经费的问题,协和医科大学免疫教学仅进行2个实验的教学,天津医科大学仅进行1个实验的教学;这限制了这些大学免疫学教学水平的发挥,也限制了学生动手能力和研究能力的提高。为此,我们在教学管理部门的批准下,开展了模块化实验教学改革
内容安排
共同模块
按实验室进行自选模块的学习
成果展示与交流
药学(12月16日)
护理(12月16日)
全体出席
实验报告(1份/人)
DV(1份/组)
汇报交流PPT(1份/组)
12月25日上午全体出席
每个实验室再分为4-5小组
免疫器官的观察
E花环实验
T淋巴细胞转化试验
免疫电泳
实验一
实验二
实验三
实验四
医学免疫学实验课
必选模块
免疫沉淀反应试验
酶联免疫吸附试验
补体介导的细胞毒试验
溶血空斑形成试验(PFC)
免疫荧光标记试验
模块一
模块二
模块三
模块四
模块五
医学免疫学实验课
自选模块
E花环
E花环
原理:正常人外周血中T细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团。这是因为人的T细胞膜上具有能和SRBC膜上的糖蛋白相结合的受体,称为E受体。已证实E受体是人T细胞所特有的表面标志,因此本试验可作为人外周血T细胞的鉴定和计数,同时作为人细胞免疫功能状态的一个检测指标,也是分离T细胞的常用方法之一。
实验结果:计数200个淋巴细胞,凡结合3个SRBC以上者为E玫瑰花阳性细胞,求出百分率即为T细胞百分比。正常值为689.9%。
吞噬细胞功能检测
吞噬细胞功能检测
基本原理:末梢血中的单核细胞落户于组织之后成为巨噬细胞,执行“清道夫”的功能,即清除死亡细胞碎片和异物抗原。在机体固有免疫中发挥重要作用。本实验以“绵羊红细胞”为异物抗原,注射入小鼠腹腔,诱导巨噬细胞对绵羊红细胞进行吞噬,并于镜下观察此吞嗜现象。
材料:
实验材料:3%硫代乙醇酸钠,1%绵羊红细胞悬液;ICR小鼠
实验器材:显微镜、解剖器械、解剖盘、湿盒、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、
实验试剂:甲醇、瑞氏染液、PBS
方法:
第一步:小鼠腹腔内注射3%硫代乙醇酸钠3ml。
第二步:四日后,注射1ml绵羊红细胞于小鼠腹腔内。
第三步:注射一小时后,处死小鼠,取腹腔巨噬细胞。
第四步:直接将细胞液滴于载玻片上,加盖玻片镜检。
实验结果:
观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现象,计算吞噬百分比,即每100个吞噬细胞中吞噬有羊红细胞的细胞数。也可用吞噬指数表示,即将100个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以100。吞噬百分比和吞噬指数一般是平行的。
注意事项:
(1)充分揉搓腹腔,尽可能将吞噬细胞冲洗下来。
(2)用尖吸管吸取腹腔液时,尽量避开腹腔脏器,避免损伤血管引起出血,影响实验结果。
补体介导的细胞毒试验
将4~6周龄小鼠处死,取出胸腺放入已加入约4ml冷Hanks液的平皿中,在100目的不锈钢网上研磨后,过筛,放入试管,离心1000rpm,5分钟,洗两次。将沉淀的细胞重悬于Hanks液中,配成1×107/ml细胞悬液。
取试管3支,标明顺序,依据实验设计依次加入1×107/ml胸腺细胞悬液、抗小鼠Thy-1的单克隆抗体(最适稀释度)及Hanks液,放入37℃水浴30分钟。取出后每管加入1%伊红-Y染液1滴,混匀,室温放置2分钟。
重新混匀后分别在一张载玻片上滴片,加盖玻片镜检。先在低倍镜下观察,再用高倍镜观察,比较3管中细胞死活情况。
补体介导的细胞毒试验步骤
酶联免疫吸附试验
包被
酶标板
封闭,洗涤
加入酶标抗体
0.1ml/孔
孵育,洗涤
加底物,显色
加入酶标记抗体
加羊抗兔IgG,0.2ml/孔。37℃孵育2小时后洗
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