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微生物鉴别方法

一、微生物鉴别方法——传统方法

在传统的分类鉴定中,微生物分类鉴定的主要依据是形态学特征、生理生化反应

特征、生态学特征以及血清学反应、对噬菌体的敏感性等。在鉴定时,我们把这

些依据作为鉴定项目,进行一系列的观察和鉴定工作。

1、形态学特征

(1)细胞形态

在显微镜下观察细胞外形大小、形状、排列等,细胞构造,革兰氏染色反应,能

否运动、鞭毛着生部位和数目,有无芽孢和荚膜、芽孢的大小和位置,放线菌和

真菌的繁殖器官的形状、构造,孢子的数目、形状、大小、颜色和表面特征等。

(2)群体形态

群体形态通常是指以下情况的特征:在一定的固体培养基上生长的菌落特征,包

括外形、大小、光泽、黏稠度、透明度、边缘、隆起情况、正反面颜色、质地、

气味、是否分泌水溶性色素等;在一定的斜面培养基上生长的菌苔特征,包括生

长程度、形状、边缘、隆起、颜色等;在半固体培养基上经穿刺接种后的生长情

况;在液体培养基中生长情况,包括是否产生菌膜,均匀浑浊还是发生沉淀,有

无气泡,培养基的颜色等。如是酵母菌,还要注意是成醭状、环状还是岛状。

2、生理生化反应特征

(1)利用物质的能力

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包括对各种碳源利用的能力(能否以CO2为唯一碳源、各种糖类的利用情况等)、

对各种氮源的利用能力(能否固氮、硝酸盐和铵盐利用情况等)、能源的要求(光

能还是化能、氧化无机物还是氧化有机物等)、对生长因子的要求(是否需要生

长因子以及需要什么生长因子等)。

(2)代谢产物的特殊性

这方面的鉴定项目非常多,如是否产生H2S、吲哚、CO2、醇、有机酸,能否

还原硝酸盐,能否使牛奶凝固、冻化等。

(3)与温度和氧气的关系

测出适合某种微生物生长的温度范围以及它的最适生长温度、最低生长温度和最

高生长温度。对氧气的关系,看它是好氧、微量好氧、兼性好氧、耐氧还是专性

厌氧。

3、生态学特征

生态学特征主要包括它与其他生物之间的关系(是寄生还是共生,寄主范围以及

致病的情况)。在自然界的分布情况(pH情况、水分程度等)、渗透压情况(是

否耐高渗、是否有嗜盐性等)。

4、血清学反应

很多细菌有十分相似的外表结构(如鞭毛)或有作用相同的酶(如乳酸杆菌属内

各种细菌都有乳酸脱氢酶)。虽然它们的蛋白质分子结构各异,但在普通技术下

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(如电子显微镜或生化反应),仍无法分辨它们。然而利用抗原与抗体的高度敏

感特异性反应,就可用来鉴别相似的菌种,或对同种微生物分型。

用已知菌种、型或菌株制成的抗血清,与待鉴定的对象是否发生特异性的血清学

反应来鉴定未知菌种、型或菌株。

该法常用于肠道菌、噬菌体和病毒的分类鉴定。利用此法,已将伤寒杆菌、肺炎

链球菌等菌分成数十种菌型。

5、生活史

生物的个体在一生的生长繁殖过程中,经过不同的发育阶段。这种过程对特定的

生物来讲是重复循环的,常称为该种生物的生活周期或生活史。

各种生物都有自己的生活史。在分类鉴定中,生活史有时也是一项指标,如黏细

菌就是以它的生活史作为分类鉴定的依据。

6、对噬菌体的敏感性

与血清学反应相似,各种噬菌体有其严格的宿主范围。利用这一特性,可以用某

一已知的特异性噬菌体鉴定其相应的宿主,反之亦然。

二、微生物鉴别方法——新技术新方法

1、细胞壁组分分析

细胞壁组分分析首先应用于放线菌分类中,把它作为区分属“”的依据之一。它比

单纯用形态进行分类更全面。

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