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乳腺癌中TK1的表达与临床价值研究及分析
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【摘要】目的:研究与分析乳腺癌中胸苷激酶1(TK1)的表达与临床价值。方法:选取我院收治的50例乳腺癌患者为对象进行研究。通过对其全部的临床资料进行回顾性分析,所有患者均采用常规HE染色检查乳腺癌组织标本,明确其临床分期、病理特点、组织学类型等,并对乳腺癌组织中的TK1、Ki-67、c-erbB-2、p53、PR、ER的表达情况采用免疫组化MaxVsion法进行检测。结果:TK1阳性表达主要存在于乳腺癌组织的细胞质中,也有部分存在于细胞核中。50例患者中,其TK1阳性率为90.0%(45/50),而在TNM分期与组织学分级中,TK1表达对比差异非常显著,且P0.05具有统计学意义。Ki-67(r=0.867)与TK1表达呈正相关;而TK1与PR表达(r=-0.385)、ER表达(r=-375)呈负相关。结论:乳腺癌中TK1的表达在不同TNM分期与组织学分级中存在差异,TNM分期以及组织学分级越高,则TK1表达越高,因而在反应乳腺癌细胞增殖方面,TK1的灵敏度较高,。而乳腺癌中TK1的表达也与PR、ER、Ki-67存在一定相关性,即PR、ER表达水平越低,Ki-67阳性率越高,则TK1的表达水平也越高。
【关键词】乳腺癌;胸苷激酶1;免疫组化;临床价值
胸苷激酶(TK)在以镁离子参与,ATP为供体的前提下,其能将胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)逐渐催化为脱氧-1-磷酸胸苷酸(dTMP),而dTMP是DNA补救合成途径中不可或缺的重要原料【1】。胸苷激酶具有两种同工酶,但只有与细胞增殖周期相关含量的胸苷激酶1可作为细胞增殖的标记物【2】。据有关临床研究显示,在肠癌、子宫颈癌、肺癌、乳腺癌中,TK1的表达与肿瘤危险程度存在一定关系,而其在乳腺癌中的表达水平与该肿瘤的恶性程度呈相关,且对此类乳腺癌患者的预后也存在一定的影响【3】。因此本文对乳腺癌中胸苷激酶1(TK1)的表达与临床价值进行了研究与分析,现具体报道如下:
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一般资料与方法
1.1一般资料
选取我院收治的50例乳腺癌患者为对象进行研究,均为女性,且均以乳腺肿块确诊。所有患者年龄为24-75岁,平均年龄为(48.23±4.27)岁。
1.2方法
通过对其全部的临床资料进行回顾性分析,所有患者均采用常规HE染色检查乳腺癌组织标本,明确其临床分期、病理特点、组织学类型等,并对乳腺癌组织中的TK1、Ki-67、c-erbB-2、p53、PR、ER的表达情况采用免疫组化MaxVsion法进行检测。具体为:(1)经手术将标本切除,重点取材肿瘤组织,并以10%福尔马林固定标本,常规HE染色检查,并于光镜下进行观察。(2)免疫组化MaxVsion法:采用购自于福州迈新公司的Ki-67、c-erbB-2、p53、PR、ER等一抗单克隆即用型抗体;华瑞同康公司的多克隆抗体鼠抗人TK1。将组织标本采用石蜡包埋,并进行4μm厚连续切片,经梯度乙醇、二甲苯脱蜡水化;然后放置于柠檬酸组织抗原修复液(pH=6.)中煮沸15min,保温20min;将容器采用冷水冲洗至室温;采用PBS清洗3次,3min/次;采用3%双氧水于室温下滴加50μL,并孵育10min,之后采用PBS清洗3次,3min/次;然后采用一抗TK1滴加后,在37摄氏度下孵育60min,采用PBS清洗3次,3min/次;只有将二抗快捷型酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物滴加进去,在37摄氏度下孵育60min,采用PBS清洗3次,3min/次;然后进行染色,采用新鲜配制的DAB,洗涤时采用蒸馏水,复染采用苏木精,返蓝采用自来水,脱水采用梯度乙醇,采用二甲苯使其透明,最后采用中性树胶进行固封。
1.3观察指标
(1)根据乳腺癌组织学分级(半定量评估法)对常规病理检查结果进行判断,主要分为三级,即G1、G2、G3。(2)采用双盲法评估免疫组化结果。胞质、胞核、胞膜无着色为阴性结果;胞质、胞核、胞膜附着有棕褐色或者棕黄色颗粒,即为阳性结果。而细胞核染色说明Ki-67、p53、PR、ER为阳性;而细胞质染色说明TK1为阳性。在每张切片上,随机选择高倍视野3个,阳性染色百分率以显微镜下计数100个细胞进行计算。阳性细胞数0-5%则为(-)、5%-25%则为(+)、25%-50%则为(++)、≥50%则为(+++)。细胞膜染色则为c-erbB-2阳性,参照《乳腺癌HER2检测指南》对染色结果进行判读:无着色为(0)、所有浸润癌细胞细胞膜呈不完整、微弱着色为(+)、10%浸润癌细胞细胞膜呈不均匀、完整、弱-中强度棕黄色着色,或者30%、呈完整且强的棕褐色着色为(++)、30%浸润癌细胞细胞膜呈完整、强的棕褐色着色为(+++)。
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