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槐花药材中总黄酮的质量分析

【实验目的】

1、掌握比色法测定槐花药材中总黄酮含量的方法及原理。

2、熟悉槐花药材的含量测定的方法学验证。

【实验原理】

槐花为豆科植物槐SophorajaponicaL的干燥花及花蕾。夏季花开放或花蕾系

形成时采收，及时干燥，除去枝、梗及杂质。前者习称“槐花”，后者习称“槐米”

。槐花药材的主要有效成份是黄酮类化合物，其中芦丁的含量最高，所以槐花药材

的鉴别及含量测定均以芦丁为指标成分。

芦丁（CHO,610.51）

273016

黄酮类化合物在碱性条件下与铝盐发生配位反应，生成红色的配位化合物，使得最

大吸收波长红移至可见光区，且具有较高的吸收系数。黄酮类与铝盐的配位反应是

定量完成的，因此可采用比色法测定槐花药材中总黄酮的含量，避免其他非黄酮成

分对测定准确度的影响。

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【仪器与试药】

仪器：紫外—可见分光光度计、100ml容量瓶、25ml容量瓶、10ml移液管，超声

波清洗器、漏斗、玻璃棒、烧杯、胶头滴管、洗耳球等。

试剂：槐花药材、芦丁对照品、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液，氢氧化钠试

液、甲醇、乙醇等。

【实验步骤】

1线性范围考察

1.1供试品溶液的制备

将槐花研碎，取粗粉约1g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加60%（V/V）乙

醇100ml，称定重量，超声30分钟，用60%（V/V）乙醇补足失重，摇匀，过滤，取

续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

（《中国药典》2015版：将槐花研碎，取粗粉约1g，精密称定，置索氏提取

器中，加乙醚适量，加热回流至提取液无色，放冷，弃去乙醚液。再加甲醇

90ml，加热回流至提取液无色，转移至100ml量瓶中，用甲醇少量洗涤容器，洗液

并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水

至刻度，摇匀。）

1.2线性关系的考察

分别取供试品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml与6ml于25ml容量瓶中，各加

水使成6.0ml，精密加5%亚硝酸钠溶液1.0ml，摇匀，放置6分钟，再加10%硝酸

铝溶液1.0ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10.0ml，加水稀释至刻度，摇匀，

放置15分钟，不加对照品溶液同法配制空白溶液，按照紫外可见分光光度法，在

500nm波长处测定各溶液的吸光度。根据响应信号选择最佳的供试品溶度。

2总黄酮含量测定

2.1对照品溶液的制备

取芦丁对照品50mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加60%乙醇适量，置水浴

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上微热使溶解，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀。精密量取10ml,置于100ml量瓶

中，加水至刻度，摇匀，即得浓度为0.2mg/ml的芦丁对照品溶液。

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