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保健食品中异麦芽糖低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定
保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定
1.范围
本方法规定了保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定方法。
本方法适用于保健食品（糖浆、糖粉、饮料、奶粉）中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定。
本方法最低检出量：异麦芽糖2μg；潘糖5μg；异麦芽三糖10μg；蔗果三糖(GF2)5μg；蔗果四糖(GF3)5μg；蔗果五糖(GF4)10μg；棉籽糖20μg；水苏糖30μg。
2.原理
试样除去蛋白后，离心、脱色，用液相色谱分析，用NH2柱分离，示差检测器测定，外标法定量。
3.试剂
除特殊说明，所用试剂均为分析纯。实验用水为去离子水或同等纯度的蒸馏水。
3.1乙腈（色谱纯）。
3.2无水乙醇。
3.3麦芽糖、异麦芽糖、潘糖、麦芽三糖、异麦芽三糖、棉籽糖、水苏糖(含量≥98%)
3.4低聚果糖（总含量≥96%，其中GF238%，GF351%，GF47%）。
3.5麦芽糖、异麦芽糖混合标准溶液：分别称取麦芽糖10.0mg，异麦芽糖15.0mg，潘糖9.0mg，麦芽三糖15.0mg，异麦芽三糖12.0mg，用水溶解，并定容至1.0mL。将此溶液逐级稀释成下列浓度：标准溶液名称：麦芽糖、异麦芽糖、潘糖、麦芽三糖、异麦芽三糖（mg/mL）
10.500.750.450.750.60
21.001.500.901.501.20
32.003.001.803.002.40
410.0015.009.0015.0012.00
3.6低聚果糖标准溶液：精密称取含GF238%、GF351%、GF47%的低聚果糖标准品0.0500g，用水溶解并定容至2.50mL。将此液逐级稀释成下列浓度：
标准溶液名称：GF2、GF3、GF4（mg/mL）
11.502.000.30
23.004.000.60
34.506.000.90
46.008.001.20
57.5010.001.40
3.7棉籽糖、水苏糖标准溶液：精密称取棉籽糖0.0400g，水苏糖0.0600g，用水溶解并定容至
4.0mL。将此液逐级稀释成下列浓度：
标准溶液名称：棉籽糖水苏糖（mg/mL）
12.03.0
24.06.0
36.09.0
48.012.0
510.015.0
由于试样中程度不同的含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖，所以在配制标准应用液时可加入适量的葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖，主要是用于定性。
将各标准系列注入高效液相色谱仪进行测定，绘制标准工作曲线。
4.仪器
4.1高效液相色谱仪（附带示差检测器）。
4.2离心机：10000r/min。
4.3分析天平：1/10000。
4.4分析天平：1/1000。
5.分析步骤
5.1试样制备
5.1.1糖浆和糖粉：称取1.0000g糖浆或0.2000g糖粉，用水稀释或溶解，并定容置10.0mL，摇匀，溶液过0.45μm滤膜，滤液用于HPLC测定。
5.1.2不含乳液体饮料：饮料直接离心，上清液过0.45mm滤膜,滤液用于HPLC测定。
5.1.3含乳液体饮料：取10.0mL试样放入烧杯中，加无水乙醇30mL，搅拌混匀，放置5min，离心，取上清液20mL在沸水浴上挥发近干。残液用水溶解并定容至5-10mL，溶液过0.45μm滤膜，滤液用于HPLC测定。
5.1.4奶粉：称取2.000g试样，放入200mL烧杯中，加水15.0mL溶解，再加45.0mL无水乙醇，搅匀，放置5min，离心，取上清液30.0mL在沸水浴上挥发近干，残液用水溶解并定容至一定体积，溶液过0.45μm滤膜，滤液用于HPLC测定。
5.2高效液相色谱参考条件
5.1.1色谱柱：不锈钢柱，内径4.6mm×300mm反相氨基柱，粒径5μm;
5.1.2柱温45℃，检测室40℃。
5.1.3流动相：乙腈+水=76+24
5.1.4流量：1.5mL/min。
5.1.5灵敏度：64。
5.1.6进样量：20μL
5.1.7在上述色谱条件下注入标准溶液和试样溶液，以保留时间定性，外标法定量。
6.分析结果的表述
6.1计算
A×Ci×V
X=——————
Ai×m×1/2
式中：X：试样中某低聚糖的含量,g/kg(g/L)。
A：试样的峰面积或峰高。
Ci：单一低聚糖标准溶液的浓度,mg/mL。
Ai：标准溶液的峰面积或峰高。
ｍ：试样质量，g（mL）。
V：试样定容体积，mL。
6.2结果表示：结果保留两位有效数字。
注：功能性异麦芽低聚糖的含量以异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖计。
7.允许差
同一实验室，平行测定两次结果的相对偏差不得超过10%。
8.准确度
准确度以回收率表示。
将某种低聚糖加入糖浆、饮料或奶粉中，做回收率实验，回收率应在
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