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马铃薯茎尖脱毒新技术（病毒钝化）规程
1范围
本文件规定了马铃薯茎尖脱毒技术的术语与定义、材料选择、催芽处理、材料消毒、资源材料保存、病毒钝化的技术和方法。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T29375-2012马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程3术语与定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
茎尖脱毒shoottipdetoxification
根据病毒在植株体内分布不均匀性及越靠近新生组织部位（如茎尖和根尖顶端生长点、新生芽的生长锥等处）病毒含量越少的原理，通过剥取茎尖分生组织进行培养获得脱毒植株。
3.2
病毒钝化virusinactivation
病毒在一定条件下（高温、抗病毒药剂）出现不侵染植株或已侵染植株缓慢。
4材料选择
选择具有品种典型特性、生长健壮，无明显病症的单株作为脱毒基础材料。
5催芽处理
将入选材料打破休眠，通过自然发芽，散光晾晒，待顶芽生长至2～3cm时待用。
6材料消毒
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取1cm顶芽放入器皿中，自来水冲洗30min后用75%酒精浸泡10s，无菌水冲洗3次，再用5%次氯酸钠溶液浸泡15min，无菌水冲洗3次，放在已灭菌的培养皿中待用。
7资源材料保存
在超净工作台上，将消毒处理过的材料接入MS培养基中，25℃条件下，光照/黑暗交替12h、3000LX下培养、保存。
8病毒钝化
8.1培养基配制
选择合适的培养基是茎尖培养成功与否的关键，参照GB/T29375-2012马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程，配制MS+6-BA0.2ppm+NAA0.05ppm+病毒唑注射液40mg/kg，pH5.8的钝化培养基组合。
8.2接种
将保存苗的顶端部分1cm组织接入钝化培养基中培养。
8.3高温钝化
将钝化培养基中的薯苗正常培养7d后，放入37℃条件下，弱光1500LX条件下培养，诱导内源生长素产生，使苗徒长，钝化病毒，增大无毒区间。
8.4脱毒
经高温处理15d后的材料，取其顶芽1mm接入普通MS培养基中，25℃条件下，光照12h，3000LX进行培养。
8.5扩繁、病毒检测
待苗长出4～5个叶片时，按单节切段，进行扩繁，用于病毒检测。
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