有哪些信誉好的足球投注网站- 1、本文档共7页，可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
植物基因组DNA的提取及定性、定量分析报告--第1页
.
《分子生物学》实验报告
实验一植物基因组DNA的提取及其定性、定量分析
[实验目的]
通过本实验学习利用CTAB法从植物组织中提取DNA并通过琼脂糖凝胶电泳及紫外分
光光度法对DNA进行定性定量分析。
[实验原理]
CTAB十六烷基三甲基溴化铵是一种阳离子型去污剂,可溶解细胞膜,在高离子强度下
大于0.7MNaCl,与蛋白和中性多糖形成复合物沉淀出来。利用液氮对植物组织进行研磨,
从而破碎细胞。然后加入CTAB缓冲液将DNA溶解出来,再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋
白,最后经乙醇沉淀得到DNA。
琼脂糖凝胶电泳是分离和纯化DNA片段的常用技术。把DNA样品加入到一块包含电解
质的多孔支持介质琼脂糖凝胶的样品孔中,并置于静电场上。DNA分子在高于等电点的pH
溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子
筛效应。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,
因此,在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分子本身的大小
和构型。DNA分子的迁移速度与相对分子质量的对数值成反比关系,分子量小的DNA分子比
分子量大的DNA分子迁移速率快,迁移距离远,由此得到分离。凝胶电泳也可以分离相对分子
质量相同,但构型不同的DNA分子,超螺旋质粒DNAcccDNA泳动最快,其次为线状DNAL
DNA,最慢的为开环质粒DNAocDNA。
核酸分子DNA或RNA由于含有嘌呤环和嘧啶环的共轭双键,在260nm波长处有特异的
紫外吸收峰,其吸收强度与核酸的浓度成正比,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基
础。1OD相当于dsDNA50μg/mL,ssDNA33μg/mL和ssRNA40μg/mL。可以此来计算核酸
260
样品的浓度。紫外分光光度法不但能确定核酸的浓度,还可通过测定260nm和280nm的紫
外线吸收值的比值A260/A280估计核酸的纯度,若DNA的A260/A280比值高于2.0,则可能有
RNA污染,低于1.8则有蛋白质污染。
[仪器、材料与试剂]
1/7
植物基因组DNA的提取及定性、定量分析报告--第1页
植物基因组DNA的提取及定性、定量分析报告--第2页
.
一、仪器及耗材
离心机、恒温水浴器、台式离心机、电子天平、水平电泳槽、电泳仪、凝胶成像分析系
统、高压灭菌锅、紫外线透射仪、微波炉、紫外分光光度仪、微量移液器10、100、1000μL
量程各一支、100mL或250mL锥形瓶、量筒、液氮、研磨棒、点样板或parafilm、吸头、
1.5mLEP管、PE手套和乳胶手套。
二、药品
三羟甲基氨基甲烷Tris、CTAB十六烷基三甲基溴化铵、β-巯基乙醇、氯仿、苯酚、
乙醇、氯化钠NaCl、盐酸、液氮、硼酸、乙二胺四乙酸EDTA、溴酚蓝、蔗糖、琼脂糖、
核酸染料。
三、试剂
1.2×CTABbuffer[1]
2.70%乙醇[2]
3.RNaseA天根[3]
4.0.5×TBE缓冲液工作浓度[4]
5.6×loadingbuffer[5]
6.核酸染料赛百盛
文档评论（0）