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生物药物白细胞介素-2--第1页

白细胞介素-2(别名:T细胞生长因子,TCGF;IL2)

刘璇璇制药14031160214309

一、简单介绍

白细胞介素-2是趋化因子家族的一种细胞因子。它是由多细胞来源(主要由活化

T细胞产生),又具有多向性作用的细胞因子(主要促进淋巴细胞生长、增殖、

分化);对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用,能刺激已被特异性抗原

或致丝裂因数启动的T细胞增殖;能活化T细胞,促进细胞因子产生;刺激

NK细胞增殖,增强NK杀伤活性及产生细胞因子,诱导LAK细胞产生;促进B

细胞增殖和分泌抗体;激活巨噬细胞。可用于临床研究和肿瘤治疗。

类型:糖蛋白;来源:主要由T细胞产生;作用方式:以自分泌和旁分泌方式

发挥效应;名词领域:免疫学

它的一般性质为:1.IL-2的产生细胞IL-2主要由T细胞(特别是CD4+T细胞)

有受抗原或丝裂原刺激后合成;B细胞、NK细胞及单核-巨噬细胞亦能产生

IL-2。

2.IL-2分子IL-2分子量为15KD,是含有113个氨基酸残基的糖蛋白,在人类

由第4号染色体上的一个基因编码。IL-2具有一定的种属特异性,人类细胞只对

灵长类来源的IL-2起反应,而几乎所有种属动物的细胞均对人的IL-2敏感。

3.IL-2受体(IL-2R)IL-2的靶细胞包括T细胞、NK细胞、B细胞及单核-巨

噬细胞等。这些细胞表面均可表达IL-2R。IL-2R包含3条多肽链:1条为α链,

分子量55KD;1条为β链,分子量75KD;另1条为γ链,分子量64KD。α链

的胞内区较短,不能向细胞内传递信号,而β链和γ链的胞内区较长,具有传递

信号的能力。3种肽链单独与IL-2结合亲和力较低,只有同时表达才能产生高度

亲和力。

二、生产工艺

材料和方法

1.制备粗制IL2无菌采血,肝素抗凝,用RPMI1640按1∶1将血液稀释,然后

重层于菲可液面上,以1500r/min离心30min,取白细胞层,用RPMI1640洗2

次,按1~3×10细胞/ml浓度加入10%胎牛血清RPMI1640,注入一装有磁棒的

大瓶中,置37℃搅拌培养4天,取出,分装于50ml离心管中,1500r/min离心

20min,弃上清液,将细胞悬浮于1%胎牛血清RPMI1640培养液中,使细胞浓度

为106细胞/ml。同时加入纯质PHA1~2μg/ml以及多种B淋巴母细胞株,使其

浓度为106细胞/ml,37℃搅拌培养18~24h后,取出以1500r/min离心30min,

取上清,用045μg滤膜过滤除菌,滤液即为粗制IL2。

制备精品IL-2

1、硫酸铵沉淀与真空浓缩透析:在4℃下将硫酸铵粉末按50%饱和量加入上述

粗制IL2中,搅拌2h,12000g离心30min,取上清液,再加入80%饱和硫酸铵,

4℃过夜,次日以12000g离心30min,弃上清液,将沉淀溶于01%PEG6000的1∶

2PBS溶液(pH值73)中,置真空负压浓缩透析器中透析浓缩至所需容量。

2、SephadexG100凝胶过滤:用2×180cm的过滤柱及PBS(同上),以80ml/h

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流速过滤。将各管洗脱液用紫外分光光度计280nm检测其OD值。同时将几种

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