破坏性试验(也称为强制降解试验).pdfVIP

之杨若古兰创作

破坏性试验，也称为强制降解试验（stressingtest），它是

在人为设定的特殊条件下，如酸、碱、氧化、高温、光照

等，惹起药物的降解，通过对降解产品的测定，验证检测

方法的可行性，分析药物可能的降解途径和降解机制.

每项破坏性试验通常包含以下内容：酸降解普通采取

0.1mol/L－1mol/L盐酸或硫酸；碱降解采取0.1mol/L－

1mol/L的氢氧化钠溶液；氧化降解采取合适的过氧化氢

溶液.以上三种试验，为了加快反应或者提高降解强度，须

要时可以加热或提高浓度；高温试验通常温度高于加速试

验温度的10℃，如50℃、60℃等，对于原料药有时需考

虑水溶液或混悬液的降解，或者考虑在分歧的pH值条件

下的降解；光照试验条件可采取4500LX.破坏性试验的具

体条件，与具体药物密切相干，需结合具体药物的特点，

选择合适的条件，使药物有必定量的降解，并对可能的降

解途径和降解机制进行分析，包管实验的意义.

药物经强力破坏发生的降解产品通常采取色谱法测

定，需结合药物和可能降解产品的理化性质，选择分歧的

色谱方法（HPLC、GC、TLC）或检测器，有时可采取分

歧分离机理的色谱零碎.上面以HPLC法分析降解产品为

例，说明在进行破坏性试验时的关注点和存在的成绩：

1、在选定的破坏条件下，药物应有必定量的降解.

虽然不是每一种破坏性条件都使药物发生降解产品，

但普通情况下，很少有一种化合物对每一种破坏性试验条

件都波动，是以，可以通过试验，选择合适的条件，如提

高酸、碱、氧化的浓度或者通过加热等，使药物降解.

对于采取HPLC法测定降解产品时，以主成分计算，

普通降解10%摆布.应采取无效的方法对降解产品进行检

测，关注测定的回收量，通常应达到90%摆布，证实检测

方法的无效性.

对于破坏性试验时降解量较大的降解产品，建议结合

波动性研讨中加速试验和持久试验的具体杂质数据，参考

ICH对新原料药中杂质的规定（每日服用最大剂量不超出

2克时，鉴定阈值为0.10%；每日服用最大剂量超出2克

时，鉴定阈值为0.05%.），须要时进行定性分析，并作为

已知杂质，根据平安性数据，采取已知杂质对照，确定合

理的限制，订入质量尺度.不克不及采取已知杂质进行对照

时，可通过测定降解产品、主成分在测定波利益的接收系

数，分析两者的差别.若两者接收系数相差较大时，建议采

取呼应因子校订后进行无效控制；如果两者接收系数相差

较小，建议采取本身对照法或峰面积归一化法进行无效控

制.

药物进行破坏性试验时通常降解为小分子物资，但也

有发生聚合，构成聚合物，如β－内酰胺类抗菌药物，在

高温或高湿时有可能发生聚合物，故应采纳无效方法进行

检测.

在这方面存在的次要成绩是：（1）主药完好降解，

没法对降解产品进行无效检测；（2）因为选择的降解条

件强度不敷，使药物未能降解，而误认为药物波动；

（3）不克不及选择合适测定方法，测定降解产品，使主

成分降解后测定的回收量偏低；（4）未考虑破坏性试验

时发生的聚合物；（5）选择的色谱流动相分歧适，在图

谱中有干扰峰.

2、分离度与峰纯度分析

破坏性试验发生的降解产品的个数比较多，采取

HPLC法测定时，需考虑主成分与降解产品之间、降解产

品彼此之间的分离度，包管降解产品峰与主峰、降解产品

峰之间有良好的分离度.另外，对于原料药，分离度符合请

求也应考虑到主药与起始原料、各合成两头体是否有良好

的分离度；对于制剂，应留意辅料、辅料降解产品的干扰.

色谱条件的确定通常以最难分离的两个降解产品或降解产

品与主成分之间的分离度符合请求作为根据之一.鉴于降解

产品检测时对分离度请求高，故推荐色谱分析时采取梯度

洗脱，以无效分离降解产品.

与分离度密切相干的是峰纯度分析.检测峰纯度通常采

取二级管阵列检测器或者液质连用技术分析测定各色谱峰

的纯度，说明在主峰中、各降解产品峰中有无包含其它峰.

简单地通过观察峰形判断峰的纯度没有说服力.对于创新药

物的破坏性试验来说，峰纯度分析非常次要，一是可以了

解降解产品的特性；二是可以无效地检出和控制杂质.存在

的次要成绩是：（1）主峰上出现明显的降解产品峰，测

定方法不成行；（2）未对峰纯度进行无效分析，这是一

种罕见景象，在此情况下没法判断主峰中是否包含着降解

产品峰；（3）对于制剂，未考虑辅料降解对测定结果的

干扰.