因此染色质又称Barr小体课件.pptVIP

人类巴氏小体的观察

目的1.了解x染色体失活假及量的制。2.通掌人X-染色的制片及察方。3.在微下正Barr氏小体的特征及其所在的位置

（一）实验原理女性细胞内X染色体上基因翻译蛋白质的量是男性的两倍吗？女性：22+XX男性：22+XYNO

剂量补偿效应定义:在XY性别决定机制的生物中，使性连锁基因在雌、雄性别中有相等或近乎相等的有效剂量的遗传效应。也就是说，在雌性和雄性细胞里，由X染色体基因编码产生的酶或其它蛋白质产物在数量上相等或近乎相等。

剂量补偿存在两种情况：雌性哺乳动物一条X染色体异染色质化(失活)，只有一条X染色体具有活性，使雌雄动物虽然X染色体数目不同但基因产物的剂量是平衡的；另一种是X染色质的转录速率不同，如果蝇雌性细胞中两条X染色体都有活性，但它们的转录速率低于雄性细胞X染色体的转录速率。

发现过程及其基本形态1949年Barr等在雌猫的神经元细胞中发现一种浓缩小体，而雄猫无。而且在其他物种的雌性个体组织细胞核中都有。因此X染色质又称Barr小体。

1955年，Barr在女性的口腔胞中Barrbody。1959年，人把性染色体异常造成的畸形与巴氏小体的研究系起来；1971年，Barrbody命名X染色；食道癌病人巴氏小体出率低于10%；正常人胞出率20-45%

莱昂假说(Lyonhypothesis)1961年,MaryLyon提出了阐明哺乳动物剂量补偿效应和形成巴氏小体的X染色体失活的假说。①哺乳动物雌性个体两条X染色体的其中一条在受精后失活;②两条X染色体中哪一条失活是随机的；③失活在胚胎早期发生(人类在胚胎发育16天时)，某一个细胞的X染色体一旦失活，这个细胞的所有后代细胞中该X染色体均处于失活状态；④杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体。

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巴氏小体在细胞周期中比有活性的X染色体复制晚X染色质的失活只是部分失活，仍然有部分基因具有转录活性，目前已知的大约有十几个基因有活性。若失活X染色质为完全失活，则XXY（Klinefelter’ssyndrome）及XO(Turner’ssyndrome)型应表现正常。Barr小体的数目=n-1(n为X染色体数目)正常女人的体细胞间期核中Barr小体为1;正常男人的体细胞间期核中Barr小体为0;XXX女人的体细胞间期核中Barr小体为2;XXXX女人的体细胞间期核中Barr小体为3.

X染色质检查的临床应用人类卵细胞受精16天后，女性的两条X染色体随机失活，形成Barr氏小体。正常女性间期细胞核中X染色质阳性率为30％－50％，而男性则低于1％。核膜X染色质性别的快速鉴定胎儿性别鉴定

巴氏小体特征u一般出在胞分裂周期的期；u直径lμm左右；u靠近核膜的，核膜清晰；u核是网状或者粒状分布；u呈微凸形、卵形、短棒形、双球形和三角形等形状。

（二）实验材料材料：口腔上皮细胞或头发毛囊细胞口腔颊部上皮细胞个体较大，容易观察，但是容易污染细菌等杂质头发毛囊细胞个体稍小，观察稍显困难，优点是不受细菌污染

（三）实验步骤1．口腔粘膜胞Barr氏小体示方法l取口腔上皮细胞并涂于干净的载玻片上，自然干燥5-10min；l1MHCl水解3-5min；l水洗3次，每次1min；l硫堇染色5-10min；l水洗去染料，显微镜观察；l若染色过深或有大量染料结晶，可用95%乙醇分色3-5sec，水洗去酒精，镜检。

2．根毛囊胞Barr氏小体色方法取有根的2—3cm，根部的1圈2—3mm的白色物体，即是毛囊胞，将其放置于片上。在毛囊胞滴加一滴45%的冰醋酸。酸解5分，可使毛囊胞得到充分化。以清水冲2-3遍。拿起上述根的梢部，将其上毛囊胞蹭于另一干片上即可达到移的目的。若用刀片或子将毛囊胞刮下，可造成胞的堆，同多胞的象。另外，1根根的毛囊胞可以3—4片上，以达到充分用材料的目的。察又可以看到清晰的涂布胞，于察滴加1滴硫染液于待胞上，注意染液不可多，以胞流失。10min后，加盖玻片即可行察。

（四）实验结果的观察X染色的：一般位于核膜内，形状多，多半形，三角形。

可数胞的a：核大，廓清除完整，无缺、染色清晰。b：核呈网状或均匀的粒状，无深染大粒及菌染

实验报告一.实验原理二.记录试验过程三.绘图表示实验结果四.在制作的玻片本中，胞廓清楚、染色清晰，核大，核呈均匀网状的胞100个，巴氏小体的率(可与男性胞照察)。