磷钼蓝分光光度法测定土壤全磷课件.pptxVIP

磷钼蓝分光光度法测定土壤全磷

2024/9/14化学实验2一.实验目的

1.掌握磷钼蓝法测定磷含量的原理和实验条件；2.熟悉分光光度计的构造并掌握正确的使用方法

2024/9/14化学实验3二.实验原理土壤全磷的测定一般都采用磷钼蓝法。在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的H2SO4和强氧化剂HClO4作用，使之完全分解，全部转化为磷酸盐而进入溶液。在一定酸度下，磷酸与钼酸铵作用生成磷钼杂多酸，以适当的还原剂将其还原成磷钼杂多蓝，使溶液呈蓝色，蓝色的深浅与磷的含量成正比，可用分光光度法测定。

2024/9/14化学实验4磷钼蓝法常用的还原剂有很多，本实验采用在酒石酸锑钾的存在下，用抗坏血酸作还原剂，将磷钼杂多酸还原为磷钼杂多蓝，常称为“钼锑抗”（钼酸铵-酒石酸锑钾-抗坏血酸试剂的简称）法。此法手续简便，颜色稳定，干扰离子允许量大，很适于进行土壤中磷的测定。钼锑抗法要求显色温度为15-60℃，颜色在8h内可保持稳定。要求显色酸度为0.45-0.65mol/L,若酸度太小，磷钼蓝稳定时间较短；若酸度过大，则显色变慢。

2024/9/14化学实验5三.仪器和试剂

仪器：分析天平，分光光度计，50mL容量瓶，100mL容量瓶，10mL吸量管，5mL移液管，10mL量筒，50mL锥型瓶，无磷滤纸，小漏斗

2024/9/14化学实验6试剂：1.浓H2SO42.70%-72%HClO43.钼锑储存液4.钼锑抗显色剂5.0.2%二硝基酚指示剂6.磷标准溶液（ρ=5.00μg/mL)

2024/9/14化学实验7四.操作步骤1.待测液的制备2.工作曲线的绘制及待测液吸光度的测定

2024/9/14化学实验81.待测液的制备准确称取通过100目筛的烘干土壤试样约1.0g于50mL锥行瓶中，以少量蒸馏水润湿，加入8mL浓H2SO4，摇动（最好放置过夜），再加入70%-72%的HClO410滴，摇匀，瓶口上放一小漏斗，慢慢加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20min,全部消煮时间约40-60min。冷却后，用干燥漏斗和无磷滤纸将消煮液滤人100mL容量瓶中，用少量蒸馏水重复淋洗，保证定量转移完全，用蒸馏水稀释至刻度，备用。

2024/9/14化学实验92.工作曲线的绘制及待测液吸光度的测定分别准确移取5.00μg.mL-1磷标准0.00,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00mL于7只编号的50mL容量瓶中，再准确移取5.00mL待测液（可根据土壤试样中磷含量的多少来确定应该吸取待测液的体积）于8号容量瓶中，分别加蒸馏水稀释至约30mL,加二硝基酚指示剂2滴，用稀NaOH溶液和稀H2SO4溶液调节pH至溶液刚呈微黄色，

2024/9/14化学实验10黄色，然后加入钼锑抗显色剂5mL,摇匀，用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。在高于15℃条件下放置30min，用1cm比色皿，在700nm波长下，以试剂空白溶液为参比依次测定各溶液的吸光度。以吸光度为纵坐标，质量浓度ρ为横坐标绘制工作曲线，根据待测液的吸光度，在工作曲线上查出相应的ρ计算原待测中含磷量，进而得到土壤全磷的含量。