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课程名称：临床免疫学检验技术

课题名称：免疫标记技术

组员：朱恩鹏拉巴卓嘎

张燕培汪婷婷

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免疫标记技术

免疫标记技术指用荧光素、放射性同位素、酶、铁蛋白、胶体金及化学(或

生物)发光剂等作为追踪物，标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。藉助于荧光

显微镜、射线测量仪、酶标检测仪、和发光免疫测定仪等精密仪器，对实验结果

直接镜检观察或进行自动化测定，可以在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上，

对抗原抗体反应进行定性和定位研究；或应用各种液相和固相免疫分析方法，对

体液中的半抗原、抗原或抗体进行定性和定量测定。因此，免疫标记技术在敏感

性、特异性、精确性及应用范围等方面远远超过一般免疫血清学方法。近年来，

随着分子生物学、细胞生物学、基础免疫学和免疫化学等学科的发展以及现代高

新技术建立的仪器分析的应用，免疫标记技术也不断完善和更新。各种新技术和

新方法不断涌现，至今已成为一类检测微量和超微量生物活性物质的免疫生物化

学分析技术，在医学和其他生物学科的研究领域及临床检验中应用十分广泛。

根据试验中所用标记物的种类和检测方法不同，免疫标记技术分为免疫荧光

技术、放射免疫技术、免疫酶技术、免疫电镜技术、免疫胶体金技术和发光免疫

测定等。

第一节放射免疫技术

放射免疫标记技术是将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相

结合，以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法，由于此项技术具有灵敏

度高(可检测出毫微克(ng)至微微克(pg)，甚至毫微微克(fg)的超微量物质，特

异性强(可分辨结构类似的抗原)、重复性强、样品及试剂用量少、测定方法易规

范化和自动化等多个优点。因此，在医学及其他生物学科的研究领域和临床实验

诊断中广泛应用于各种微量蛋白质、激素、小分子药物及肿瘤标志物等的分析与

定量测定。

（一）放射免疫测定(RIA)

放射免疫测定(Radioimmunoassay，RIA)是1959年Yalow和Berson

首先创建的经典放射免疫分析技术，用于血清中胰岛素含量的测定。30多年来，

由于此项技术灵敏、特异、并已制成多种标准试剂盒，使用方便，应用范围十分

广泛。目前国外已成功地应用RIA检测的物质多达300余种，国内研究的被测物

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质也达百余种，试制的RIA试剂盒已有60余种，是测定各种微量物质不可缺少

的手段。

（二）免疫放射测定(IRMA)

1968年Miles和Hales应用同位素标记的抗胰岛素抗体检测牛血清中胰岛

素获得成功，为了区别于经典的放射免疫测定(RIA)，他们将其称为免疫放射测

定或免疫放射度量分析(IRMA)。由于在反应系统中使用过量的标记抗体，且无竞

争性抑制反应，因此抗体与待测抗原达到结合状态的化学平衡，在2-3h即可完

成，较少受到抗体亲和常数的限制，即使单克隆抗体的亲和力较低，也能满足试

验要求。同时一个抗原分子可以结合多个标记抗体分子，使IRMA的灵敏度明显

高于RIA。

基本原理：IRMA是待测抗原与过量标记抗体的非竞争综合反应，然后加入