固体培养基和液体培养基课件.pptVIP

一、课题目标：了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。二、课题重点和难点：无菌技术的操作。三、技能目标：掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。

一、基础知识：(一)微生物病毒病毒界细菌原核生物界放线菌真菌微生物包括哪五类：真菌界原生动物原生生物界特点：结构简单,形体微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.

细菌的外形与大小细菌：单细胞不分枝的原核微生物。细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色后显微镜观察

细菌的构造细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。图1-3细菌的结构

*细胞壁?结构特点：坚韧且有弹性?细胞壁有哪些功能？?①固定细胞外形；伤寒杆菌细胞壁中含毒素w③阻拦大分子物质进人细胞；w④使细胞具有致病性及对噬菌体的敏感性。w②保护细胞免受外力的损伤；

有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.

菌落：?单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。?菌落是鉴定菌种的重要依据。

菌落细菌的菌落特征因种而异

细菌的营养类型?根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。?自养菌:分类,举例?光合自养型:光合细菌化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌?异养菌:?腐生菌?寄生菌大部分病原菌

放线菌1、结构：?单细胞原核?分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）

真菌

1、培养基可以分为哪两类？2、培养基一般都含有哪些营养物质，此外还要满足哪些要求？3、获得纯净培养物的关键是什么？4、避免杂菌污染的方法主要包括哪四个方面5、什么是消毒、灭菌，常用方法有哪些？6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤7、如何倒平板？

（二）培养基培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。1.培养基的类型和用途（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、半固体培养基。其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等，半固体培养基可观察微生物的运动，液体培养基常用于发酵工业。（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。

选择培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:分离杂交瘤细胞

合成培养基:天然培养基：根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。优点：营养成分丰富，培养效果好缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;

培养基的营养物质2、培养基一般都含有哪些营养物质，此外还要满足哪些要求？不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。

?1．碳源、氮源及生长因子的来源与功能归纳养要素来源功能CO、NaHCO、无机碳源23①构成胞物和一些代物；CaCO等含碳无机物3碳源糖、脂、蛋白、有机酸、石油、花生粉等有机碳源②有机碳既是碳源又是能源

无机氮：NH、、硝酸、N等无机氮源将无机氮合成含氨的代32氮源牛肉膏、蛋白、合成蛋白、核酸及含氮的代有机氮源核酸、尿素、氨基酸①和核酸的生素、氨基酸、成成分；②参与生因子碱基代程中的促反

人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。血清中含有：①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）②多种金属离子；③激素；④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分

液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长

固体培养基：菌落，菌苔

半固体培养基：无动力散)有动力(弥(是否运动)