生物药物分离技术.pdfVIP

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第二章

表面活性剂分子在溶剂中缔合形成胶束的最低浓度即为临界胶束浓度

反胶团:表面活性剂的极性头朝内,疏水的尾部向外,中间形成极性的

“核”。

反胶团特异性功能:(1)具有分子识别并允许选择性透过的半透膜的功

能;(2)在疏水性环境中具有使亲水性大分子如蛋白质等保持活性的功能。

反胶团萃取优点:(1)有很高的萃取率和反萃取率并具有选择性;(2)分

离、浓缩可同时进行,过程简便;(3)能解决蛋白质(如胞内酶)在非细胞环境

中迅速失活的问题;(4)由于构成反胶团的表面活性剂往往具有细胞破壁功效,

因而可直接从完整细胞中提取具有活性的蛋白质和酶;(5)反胶团萃取技术的成

本低,溶剂可反复使用等。

吸附分离法

吸附是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择吸附的能力,使其富集

在吸附剂表面,而从混合物中的分离的的过程。

吸附法特点:(1)不用或少用有机溶剂(2)操作简便、安全、设备简单

(3)生产过程pH变化小(4)从稀溶液分离溶质(5)吸附剂对溶质的作

用小(6)吸附平衡为非线性(7)选择性较差

吸附的类型:(1)物理吸附:放热,可逆,单分子层或多分子层,选择性

差吸附速度较快,需要的活化能很小(2)化学吸附:放热量大,单分子,选择

性强吸附速度慢,需要一定的活化能(3)交换吸附:吸附剂吸附后同时放出等

当量的离子到溶液中

活性炭是非极性吸附剂,在水中吸附能力大于有机溶剂中的吸附能力。对极

性基团多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物。

活性炭种类颗粒大小表面积吸附力吸附量洗脱

粉末活性炭小大大大难

颗粒活性炭较小较大较小较小难

锦纶活性炭大小小小易

大网格吸附树脂适合于提取各种有机化合物。优点(1)选择性好(2)解

吸容易(3)机械强度好(4)流体阻力小(5)反复使用(6)可适用于各种

产品

硅胶是极性吸附剂,具有微酸性,适用于分离酸性和中性物质.硅胶的活性与

含水量有关:含水量高则吸附力减弱。当游离水含量17%以上时,吸附能力极低.

亲和吸附分离是利用溶质和吸附剂之间特殊的化学作用,从而实现分离。

吸附剂由载体(Carrier)和配位体(Ligand)组成

亲和吸附的特点:a效率高:利用亲和吸附可以从粗提液中一次性分离得到

高纯度的活性物质。b分离精度高:可用于分离含量极低,结构相近的化合物c

通用性较差,洗脱条件苛刻

亲和吸附的载体通常是惰性的,往往不能直接与配基连接,偶联前需要先活

载体经活化后,就可以进行与配基的偶联反应。

载体的活化:a溴化氰活化法:琼脂糖、葡聚糖引入亚氨基碳酸盐b高碘酸活

化法:氧化多糖,生成烷基胺c环氧化法:多糖类载体与环氧氯丙烷作用生成环

氧化合物,再与氨基偶联d甲苯磺酰氯法:双功能试剂法二乙烯砜

配基偶联方法:碳二亚胺缩合法(脱水)酸酐法叠氮化法重氮化法

固相析出分离法

盐析:在高浓度的中性盐存在下,蛋白质(酶)等生物大分子物质在水溶液

中的溶解度降低,产生沉淀的过程

盐析法机理:1)破坏水化膜,分子间易碰撞聚集,将大量盐加到蛋白质溶液

中,高浓度的盐离子有很强的水化力,于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消

失,使蛋白质分子因热运动碰撞聚集。2)破坏水化膜,暴露出憎水区域,

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