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肉仔鸡疑似禽传染性脑脊髓炎的诊断

鸡传染性脑脊髓炎是一种由病毒引起的主要侵害幼雏中枢神经系统，以共济失调、头颈震颤、站立不稳为主要症状，非化脓性脑炎为主要病变的急性、高度接触性传染病。2003年3月，某鸡场饲养的商品肉仔鸡（20天龄左右）陆续出现以共济失调，不喜欢走动、嗜睡、头颈震颤为特征的病例。通过流行病学调查，结合临床症状、病理剖检变化和实验室检查，初步诊断为鸡传染性脑脊髓炎。现将情况报道如下。

一、流行病学调查

2003年2月25日，某鸡场购进石歧杂鸡苗5000只，3月12日部分小鸡开始发病。最初几天每天死亡20～50只，3月16日之后发病率及死亡率剧增。曾怀疑暴发新城疫，紧急接种新城疫Ⅳ系疫苗，5羽份/只，结果发病率及死亡率均未见降低，死亡最高的一天为210只；随着小鸡日龄的增大死亡率逐渐减少，40天龄以上的鸡只除极少数头颈轻微颤抖外，其他基本正常，累计死亡率达28%～30%。该场小鸡的免疫接种程序是：1天龄颈皮下接种马立克氏病疫苗，1羽份/只；3天龄滴眼接种新支二联疫苗，1羽份/只；8日龄饮水免疫接种传染性囊病疫苗，1羽份/只；13天龄饮水免疫接种新城疫Ⅳ系疫苗，2羽份/只；25～28天龄肌注接种新城疫I系疫苗，1.5羽份/只。

二、临床症状

发病雏鸡大多数表现迟钝，目光呆滞，精神沉郁，嗜睡，拉稀；站立不稳，不喜欢走动而喜欢蹲坐于跗关节上，驱赶可勉强走动，但脚发软，步伐和速度失去控制，张开翅膀以保持平衡，最终倒卧一侧无法站立；腿、翼，尤其是头颈部可见到明显的阵发性音叉式的震颤，尤其受到惊扰和刺激时表现明显。病雏在早期仍能自行采食和饮水，随着病情的加重就再不能走动和站立，常常倒卧在食槽旁，由于卧地得不到食物和饮水而渐渐虚脱，虽然常有啄食动作，但食量很少，同时受到鸡群的践踏，大部分病鸡以死亡为转归。

三、病理变化

剖检部分病、死鸡，大部分脑部水肿，有的脑部有出血点；肌胃肌层中有细小灰白区。其他脏器未见有明显肉眼病变。

四、实验室诊断

1.病原分离：以无菌操作取具有典型症状的病鸡的脑、肝、脾研磨成匀浆，用PBS按1∶5稀释，反复冻融2～3次，将病料分成两份，一份留下作为接种鸡只，另一份以4000转/分离心10分钟，取上清液，按2500单位/毫升各加入青霉素、链霉素，置4℃冰箱作用3～4小时。无菌检查合格后，尿囊腔接种8天龄鸡胚6只，0.2毫升/只，于37℃温箱培养。每天照胚4次，观察并记录鸡胚死亡情况。

结果胚胎于24小时内死亡的占1/6，48小时死亡的占3/6，72小时死亡的占1/6，未死的鸡胚占1/6。

无菌操作收集48～72小时死亡鸡胚的尿囊液，并将收获的鸡胚尿囊液接种普通琼脂斜面，置37℃培养48小时，未见细菌生长。

观察死亡的胚体，见胚体有出血点，脑部水肿。

2.红细胞凝集试验（HA）：反应板1～12孔红细胞全部沉降于孔底呈圆点状，无凝集反应。结果表明收获的鸡胚液不含可凝集鸡红细胞的病毒，因此可排除新城疫及禽流感。

3.动物接种试验：

（1）将病料悬液肌肉注射接种45天龄鸡4只（未接种过新城疫和脑脊髓炎疫苗），其中两只肌肉注射3毫升/只，另两只肌肉注射1毫升/只。观察10天，结果4只鸡均未见有任何临床症状出现。

（2）将10天龄小鸡6只平均分为2组，每组3只。取无菌检查合格的胚液1毫升，按10的倍比稀释至100倍，第1组肌肉注射接种0.5毫升/只；第2组肌肉注射接种原胚液0.5毫升/只；观察14天，记录鸡只的病状及死亡情况，结果第2组于接种后48小时3/3死亡；第1组于接种后72小时3/3死亡；出现明显症状，发病初期表现为精神不振、目光呆滞、嗜睡，随后发生进行性共济失调，尤其是被驱赶而走动时两翅张开以保持平衡，同时表现不能控制速度和步态，最终倒卧一侧或轻瘫，以跗关节着地，坐于脚踝，不愿走动，或以跗关节着地爬行，明显的头颈震颤。随着病情的加剧，由于得不到食物和饮水导致身体衰弱而无法站立，倒卧于食槽旁，发出痛苦的叫声，症状与发病鸡群相似。接种后48～72小时，由于无法进食和饮水及鸡只之间践踏，最终归于死亡。

（3）剖检变化。剖检死亡的鸡只，病死鸡小脑水肿、充血，脑膜上有出血点，个别雏鸡大脑水肿、脑膜充血；腺胃肌层中有散在的细小灰白色坏死区；关节滑膜增厚、充血，关节囊充满纤维素性渗出物。其他脏器未见明显肉眼病变。

4.病理组织学检查：取病死鸡只的全脑、部分脊髓、肝脏、胰腺和十二指肠、肌胃、腺胃、心脏，进行病理组织切片镜检。结果是：心肌变性、瘀血、水肿、点状出血；肝脏瘀血，肝细胞变性；腺胃黏膜点状出血、肌层淋巴细胞浸润，胰腺淋巴滤泡灶状增生；小脑瘀血、水肿，大脑水肿、病毒性脑炎并伴灶性坏死，脊髓未见明显病变。

五、防制措施

1.出现典型症状的雏鸡立即挑出淘汰、焚烧或扑杀深埋，以减轻同群感染。

2.将原地面饲养5000只鸡