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牙周健康状况与腔隙性脑梗死相关性初探
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【摘要】：目的牙周病和腔隙性脑梗死都是中老年人的常见病和高发病,牙周病可使全身炎性标记物升高,促进与炎症有关的动脉粥样硬化形成,而动脉粥样硬化是腔隙性脑梗死的主要病因之一。本文通过对本省部分享有医疗保健的离退休干部进行牙周健康检查和全身状况调查,在此人群的横断面上探讨牙周健康状况与腔隙性脑梗死患者的流行病学关系以及牙龈状况对腔隙性脑梗死患者血脂及血流变学指标的影响。
关键词］脑梗死牙周炎抗体
牙周炎是由菌斑生物膜引起的牙周组织慢性感染性疾病，与脑梗死相关性已有大量报道。动脉粥样硬化性脑梗死是脑梗死最为常见的疾病类型，急性期反应蛋白（APP）和白介素-6(IL-6)可直接或间接参与其病变的发生或发展。牙周临床指标并不能较好的反映由牙周炎所引起的全身效应。牙周致病菌血清抗体水平与病原菌全身扩散的程度呈明显正相关，可较好反映牙周炎全身效应，灵敏度强于牙周临床
指标［４］。牙龈卟啉单胞菌（Ｐｇ）是最重要的牙周可疑致病菌之一，ＩｇＧ抗体是机体感染时产生的主要抗体。有关牙周感染对脑梗死患者ＡＰＰ及ＩＬ－６影响的研究较为少见，本文通过比较急性脑梗死组与健康对照组及Pg-IgG抗体阳性Pg-IgG(+)与Pg-IgG抗体阴性Pg-IgG(-)受试者之间超敏C反应蛋白Hs-CRP、纤维蛋白Fg和IL-6水平，来判断牙周感染对急性脑梗死发病的影响。
１材料与方法
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１主要试剂与仪器Ｐｇ标准菌株ＡＴＣＣ３３２７７辣根过氧化物酶标记的兔抗人ＩｇＧ抗体（武汉博士德），人Ｈｓ－ＣＲＰＥＬＩＳＡ试剂盒（上海蓝基），人ＩＬ－６ＥＬＩＳＡ试剂盒（武汉博士德）。１．２研究对象随机选择首次发作急性脑梗死患者８８例，均为本省２０１１年２月～２０１１年１２月神经内科住院患者，经头颅ＣＴ和／或ＭＲＩ检查符合第四届全国脑血管病会议制定的脑梗死诊断标准。在同期健康体检人群中随机选择与脑梗死组年龄、性别比例相匹配的非脑梗死健康受试者４０例。同时，以Ｐｇ－ＩｇＧ抗体水平高低分别将脑梗死患者和健康受试者分为Ｐｇ－ＩｇＧ+组和Ｐｇ－ＩｇＧ-组。
1.3收集标本于入院次日清晨抽取受试者空腹静脉血４℃低温离心（3000r/min）20min,收集血清并分装至ＥＰ管中，－８０℃超低温冰箱保存。
1.4血清Ｐｇ－ＩｇＧ抗体滴度测定Ｐg冻干菌超声粉碎并稀释为10mg/l,按每孔１００μＬ加入酶标板中，３７℃孵育2H，甩出板内溶液后加2%牛血清白蛋白200μＬ，4℃过夜，将受试血清行2倍比稀释并依次加入酶标板中，37℃孵育２ｈ；ＰＢＳＴ洗板后加５０００倍稀释的辣根过氧化物酶标记的兔抗人ＩｇＧ抗体２００μＬ，３７℃孵育１ｈ；ＰＢＳＴ洗板后加０.4g/L邻苯二胺２００μＬ,室温孵育３０ｍｉｎ；每孔加２ｍｏｌ／Ｌ硫酸溶液５０μＬ，酶标仪测定４９０ｎｍ波长Ａ值。以Ａ值为空白对照孔２倍时的稀释度为最高稀释度，其倒数为Ｐｇ－ＩｇＧ抗体滴度，以ｌｏｇ２转换后的数值表示。将抗体滴度大于牙周健康者抗体滴度平均值＋２×标准差定义为抗体阳性。
１．５血清Ｈｓ－ＣＲＰ浓度测定复融受试血清，于酶标板中分别加５０μＬ标准品或受试血清，并加入００μＬ酶标记液，３７℃孵育１ｈ；洗板后加显色剂Ａ、Ｂ液各５０μＬ，２５℃反应１０ｍｉｎ；各孔加５０μＬ终止液，酶标仪测定４５０ｎｍ波长Ａ值。绘制Ｈｓ－ＣＲＰ拟合曲线，选择拟合度最好的曲线计算Ｈｓ－ＣＲＰ浓度。
１．６血清Ｆｇ浓度测定Ｆｇ浓度的测定由全自动血凝分析仪完成。
１．７血清ＩＬ－６浓度测定复融受试血清，配制ＩＬ－６标准品；于酶标板中分别加１００μＬ标准品或受试血清，３７℃孵育９０ｍｉｎ；甩出板内溶液后加０.１ｍＬ生物素抗人ＩＬ－６抗体液，３７℃反应９０ｍｉｎ；ＰＢＳ洗板后加入０．１ｍＬＡＢＣ工作液，３７℃反应０ｍｉｎ；ＰＢＳ洗板后加入９０μＬＴＭＢ显色液,３７℃反应３０ｍｉｎ；各孔加０．１ｍＬＴＭＢ终止液，酶标仪测定４５０ｎｍ波长Ａ值。绘制ＩＬ－６拟合曲线，选择拟合度最好的曲线计算ＩＬ－６浓度。
２结果
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１组间基本特征比较急性脑梗死组与健康对照组之间，以及Ｐｇ－ＩｇＧ（＋）组和Ｐｇ－ＩｇＧ（－）组之间年龄、性别构成、身体质量指数（ＢＭＩ）、血压和血糖水平均未见有统计学意义的差异，见表１：
表1组间基本特征比较
ｘ±ｓ
血压／
组别
Ｎ
年龄／岁
男
∶
女
／·（２）－１
ｍｍＨｇ
血糖／·
－１
ＢＭＩｋｇｍ
收缩压
舒张压
ｍｍｏｌＬ
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