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有效控制沙门氏菌对饲料的影响
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摘要:沙门氏菌属是一大类血清学相关的革兰氏阴性杆菌,其致病能力强,感染动物后常导致严重的疾病,并成为人类沙门氏菌病的传染源之一。在世界各国的各类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常居榜首。由于沙门氏菌属的细菌种类繁多,已发现2500种以上的血清型,使得传统检测方法难以满足实际需要。因此,创建快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。
关键词:沙门氏菌;饲料;影响
引言
沙门氏菌属抗原复杂,菌型繁多,在动物产品、动物、水产品、肠杆菌科的其他菌属细菌中常常可检出沙门氏菌,如粘质沙雷氏菌、奇异变形杆菌等干扰素的存在,对检验人员的判断产生影响。沙门氏菌是肠杆菌科的较重要的肠道致病菌,可导致关节炎、胆囊炎、骨髓炎、急性肠胃炎、败血症、伤寒等疾病,且大部分菌同时是禽类、动物类的病原菌,可引发羊、马流产、鸡白痢、鼠伤寒等急性传染病,危害极大。在食品安全中检测沙门氏菌具有重要的价值。
1沙门氏菌病的概述
沙门氏菌病是指由沙门氏菌引起的疾病。沙门氏菌是革兰氏阴性的胞内细菌,有两个种属,即邦戈沙门氏菌(S.bongori)和肠道沙门氏菌(S.enterica)。邦戈沙门氏菌主要存在于爬行动物,很少引起温血动物的感染。肠道沙门氏菌有两千多个血清型,其中一些血清型在世界范围内尤其是发展中国家引起严重的感染。
伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌可以引起伤寒,一种以发热,肠穿孔,出血,淋巴结肿大等为特征的系统性疾病。伤寒沙门氏菌有高度的宿主特异性,只引起人类疾病并不感染其它动物。它通过粪口途径传播,通常是由于食物或者水被细菌感染。如果没有并发症的发生,这种疾病通常会在4个月后痊愈。它多发于亚洲,非洲和南美。
2沙门氏菌的来源
2.1饲料原料污染
进入饲料厂的每一种原料都可能携带沙门氏菌,认识到这点很重要。全粒谷物如小麦和大麦的污染风险很低,因为它们外部依旧包裹着天然保护层。不过,进行常规质检仍然很重要。谷物应足够干燥,不应有受损的迹象,比如籽粒破裂。在储存方面,需要保持良好的通风,以防谷物受潮,孳生微生物。像豆粕、葵花籽粕和菜籽粕等原料的污染风险较高,因为经压榨、破碎或其他形式的加工处理后,它们的天然保护层已被去除。另一个隐患是,这些籽实被挤压加热到80~100℃后,需要冷却下来。
2.2饲料生产线中的沙门氏菌
饲料原料并非是沙门氏菌的唯一来源。由于饲料生产过程中饲料原料在生产线上的残留,一些有害微生物,包括霉菌和沙门氏菌在死角内快速生长,成为沙门氏菌持续传播的重要来源。根据对英国某饲料厂的检测结果,在饲料的上料管线、冷却器及成品仓、混合机等部分都检测到沙门氏菌。另外,饲料生产线中容易滋生螨虫和甲壳虫,因此需要做饲料管线的熏蒸和除虫工作。
3沙门氏菌常用的检测方法
3.1免疫学法
免疫学法是利用抗原抗体特异性反应的一种应用型技术。最初发展的免疫酶测定方法是酶与抗体或抗原结合,用以检测组织中相应抗原或抗体,后来发展为将抗原或抗体吸附于固相载体,在载体上进行酶染色,底物显色后,用肉眼或分光光度计判定结果,即为ELISA。
1977年Kryinski与Heimsch首次将酶联免疫吸附测定法用于食品沙门氏菌检测。随着生物技术的进步,文其乙等人在此前基础上应用沙门氏菌属特异性单克隆抗体CB8和de7建立了检测沙门氏菌的直接ELISA,并形成了快速检测试剂盒。此外,还应用ELISA方法对500份蛋品检测,结果表明方法可靠且阳性率比国标高;田银芳等应用直接ELISA法对350份奶样进行沙门氏菌检测与常规方法相比,该法灵敏度和特异性分别为100%,99.7%s。结果表明ELISA方法敏感性高,特异性强,稳定性和重复性好,操作简便,便于在基层推广使用。
3.2探针方法
检测沙门氏菌探针方法的原理是将纳米粒子与数百个量子点连接起来,制备用于信号放大的显示探针,并且使用亲和性和生物素的特异性结合原理,制备能捕捉到沙门氏菌DNA荧光强度的探针。Cremonesi等(2014)利用TaqMan荧光探针建立实时PCR对沙门氏菌进行检测,灵敏度达1pg基因组DNA,相当于1cfu/mL。谢同彬等(2017)通过制备CdTe量子点-纳米金显示探针与磁性纳米粒子捕获探针结合成的复合纳米探针对样品进行检测发现,沙门氏菌为10~1000fmol/L时,其DNA浓度与荧光强度展现出较好的线性关系,检出上限为8fmol/L,最低限值为4fmol/L。探针方法具有敏感、特异、简便、快速的特点。
4如何有效控制沙门氏菌对饲料的影响
4.1益生菌的应用
益生菌是一种有助于建立并保持肠道菌群平衡的微生物。在孵化后的最初几天,肠道菌群平衡的发育
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