动物肝组织中丙二醛含量测定方法的改进.pdf

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动物肝组织中丙二醛含量测定方法的改

(作者:___________单位:___________邮编:___________)

【摘要】目的初步探讨糖类物质对肝组织中丙二醛(MDA)

含量测定的干扰并改进测定方法。方法该实验以含糖量不同的小鼠肝

匀浆作为实验材料,通过葡萄糖在450nm和532nm处吸光度值的正相

关关系建立直线回归方程,校正MDA在532nm处的吸光度值。计算出

样品中MDA含量。结果肝组织中糖类物质会干扰MDA含量的测定,尤

其是当样品中糖量含量间差异较大时,糖的干扰可能导致对机体受损

程度的错误评判。结论改进后的方法更为科学、准确,可应用于动物

肝组织丙二醛含量的测定。

【关键词】丙二醛;灵芝多糖;葡萄糖;直线回归法

丙二醛(Malomdialdehvde,MDA)是机体内的氧自由基攻击生物膜

中的多不饱和脂肪酸,形成的脂质过氧化物,测试MDA的量可反映机

体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度[1]。传统的

测定方法是利用过氧化降解产物中的丙二醛与硫代巴比妥酸(TBA)

在高温和酸性条件下缩合,形成的红色产物三甲川(3,5,5-三甲基

恶唑2,4-二酮)于532nm处有最大吸收峰来进行测定的。这种方式

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常常受到多种物质不同程度的干扰[2]。其中最主要的干扰因素是组

织内的可溶性糖。动物肝组织中含有大量的肝糖原,在测定时降解的

葡萄糖会干扰测定。而探讨动物组织中糖类物质对MDA测定的干扰及

消除方法还未见报道。本研究以含糖量不同的小鼠肝匀浆作为实验材

料,初步探讨了葡萄糖对肝组织中MDA含量的测定的干扰并改进了测

定方法。

1材料

1.1动物清洁级昆明种雄性小鼠,18~20g,由湖北省疾病预防

控制中心实验动物研究中心提供。动物饲养室温度为22~25℃,湿

度为65%~80%。

1.2试剂丙二醛(MDA)测定试剂盒,购于南京建成工程研究所。

其它化学试剂均为分析醇。

1.3仪器752型紫外光栅分光光度计(上海精密科学仪器有限公

司);飞鸽牌TGL-16C离心机(上海安亭科学仪器厂);解剖剪。

2方法

2.1动物分组及给药清洁级昆明雄性小鼠48只,体质量18~20

g。参照文献[3]的方法,将实验动物按体重随机等数分为4组,即

对照组(controlgroup,CG)、多糖高剂量组(high-dosegroup,

HG)、多糖中剂量组(medial-dosegroup,MG)、多糖低剂量组

(low-dosegroup,LG),每组12只。对照组0.3ml/d生理盐水灌

胃,其余3组以0.3ml/d不同浓度的灵芝多糖溶液灌胃,多糖高、

中、低剂量的服用量分别为200,100,50mg/(kg·d)。实验期间小

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