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沙门氏菌检验

1.范围

本法适用于食品中沙门氏菌的检验。

2.设备和材料

处微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

2.1冰箱：2℃～5℃。

2.2恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃。

2.3均质器。

2.4振荡器。

2.5电子天平：感量0.1g。

2.6无菌锥形瓶：容量500mL，250mL。

2.7无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。

2.8无菌培养皿：直径90mm。

2.9无菌试管：3mm×50mm、10mm×75mm。

2.10无菌毛细管。

2.11pH计或pH比色管或精密pH试纸。

2.12全自动微生物生化鉴定系统。

3.培养基和试剂

3.1缓冲蛋白胨水（BPW）。

3.2四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液。

3.3亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液。

3.4亚硫酸铋（BS）琼脂。

3.5HE琼脂。

3.6木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂。

3.7沙门氏菌属显色培养基。

3.8三糖铁（TSI）琼脂。

3.9蛋白胨水、靛基质试剂。

3.10尿素琼脂（pH7.2）。

3.11氰化钾（KCN）培养基。

3.12赖氨酸脱羧酶试验培养基。

3.13糖发酵管。

3.14邻硝基苯β-D-半乳糖苷（ONPG）培养基。

3.15半固体琼脂。

3.16丙二酸钠培养基。

3.17沙门氏菌O和H诊断血清。

3.18生化鉴定试剂盒。

4.检验程序

沙门氏菌检验程序见图1。

检样

36℃±1℃，18h～24h

42℃±1℃，18h～24h36℃±1℃，18h～24h

36℃±1℃，40h～48h36℃±1℃，18h～24h

25g（mL）样品+225mLBPW

图1沙门氏菌检验程序

5.操作步骤

1mL+TTB10mL1mL+SC10mL

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5.1前增菌

称取25g（mL）样品放入盛有225mLBPW的无菌均质杯中，以8000r/min～10000r/min均

质1min～2min，或置于盛有225mLBPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。若

样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH值，用1mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8

±0.2.无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培

养8h～18h。

如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃～5℃不超过18h解冻。

5.2增菌

轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL，转种于10mLTT