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(完整版)紫外可见分光光度法在抗生素类药物分析中的应用
紫外可见分光光度法在抗生素类药物分析中的应用
综述了近年来紫外可见分光光度法在抗生素药物分析中的应用,其中包括内酰胺类、氨基糖
苷类四环素类、大环内酯类、喹诺酮类抗生素;并展望了该方法今后的发展趋势。
自1940年青霉素应用于临床以来,已发现的抗生素种类达千余种,临床中常用的亦有上百
种。据报道,在欧美等发达国家,抗生素的使用量占到所有
药品的10%左右;而在我国医院的使用量普遍在30%~50%之间。畜牧业、渔业中使用的抗生
素更多,其用量远远超过人类各种抗生素使用量的总和。准确测定生产过程及临床应用的抗生
素含量,对合理使用抗生素具有重要意义。紫外可见分光光度法因分析手续简便,仪器简单,无
需高价维护,能满足常规检测需要,在抗生素分析中被普遍使用.近几年来,借助紫外可见分光
光度法研究抗生素的论文就有上百篇,本文就这一时期的有关报道进行简要评述。
1抗生素的常见分析方法
在抗生素分析检测中,目前常用的方法有微生物检定法、质谱法(MS)及色谱法(包括薄层色
谱TLC、高效液相色谱HPLC、气相色谱GC、毛细管电色谱CEC)等。微生物检定法元需
对抗生素多种活性成分进行分离,可体现药品的医疗价值,但是也存在步骤繁琐、成本高、误
差大等缺点。色谱法,先分离后检测,具有灵敏、准确,分析速度快等优点,与MS法联用还可
提高选择性和灵敏度.但是,HPLC、GC、MS等仪器昂贵,设备维护费高,极大地限制了其普及。
紫外可见分光光度法恰恰在经济、实用方面弥补了大型仪器方法的不足;其仪器简单,无需高
价维护,分析手续简便,能满足纯药品常规分析的需要,因而在高等院校、医院、药厂等基层
单位,UV光度计的使用率远高于色谱法和生检法。
2紫外可见分光光度法
紫外可见分光光度法是基于分子内电子跃迁而建立起来的一种光谱分析方法。其中Л—Л,P—
Л共轭体系的电子跃迁较有实用价值,前者能产生较强吸收峰,后者往往具有增色作用。紫外可
见光度法定量分析的基础是朗伯-—比尔定律:A=cbc。经过半个世纪的发展,紫外可见光度法
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已经形成了一些比较成熟的测定方法,如普通光度法常以蒸馏水为参比无需显色剂,在最大吸收
下直接测定;显色光度法是利用被测物与显色剂的显色反应,以试剂空白或样品空白为参比,在
显色波长下进行测定;如果测定波长选择显色剂的褪色波长,则称为褪色法.对于多组分样品,
由于总吸收为各组分吸收的总和,如于两波长分别测定后,建立方程组,可同时测得2个组分的
含量,此为双波长法.对于吸收出现肩峰的情况可先对吸收曲线进行求导处理,再选择峰值为测
量点,此为导数法.其它常用的方法还有双光束法、示差法、等吸收法等.
3抗生素类药物的结构与光谱吸收
不同作者对抗生素的分类方法有所不同,顾觉奋[1]将抗生素分为5大类:(1)内酰胺类;(2)
氨基糖苷类;(3)四环素类;(4)大环内酯类;(5)其它类。本文依据此分类,并将近年研究较
多的喹诺酮类抗生素单独列为一类,简述抗生素的结构及紫外吸收特征。
3.1β—内酰胺类抗生素
*
分子含有β-内酰胺环结构,如图1所示。β—内酰胺环状Л-Л吸收在200nm以下,当侧链含
有其它显色或助色基团时,可在200nm以上产生吸收。临床应用中绝大多数β—内酰胺类抗生
素都有紫外吸收。
3。2氨基糖苷类抗生素
氨基环醇与氨基糖缩合而成的苷,其特点是一般不含Л—Л共轭体系,但含多个羟基和氨基;易
溶于水,易形成配合物,可用显色法进行测定。常用的显色剂有Fe3+离子、依文思蓝、曲利本红、
曲利本蓝、滂胺天蓝等。
3。3四环素类抗生素
以四并苯环为母核,基本结构如图3所示,含有苯环,且环外-C=O使共轭体系增长。通常在
210~250nm有K带强吸收,在260~300nm有B带强吸收或
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