吸光光度分析剖析课件.pptVIP

化工分析化工分析

第八章吸光光度分析1物质对光的选择性吸收2显色反应及其应用3分光光度计及其操作4定量分析方法化工分析

8.1物质对光的选择性吸收光吸收的本质光吸收曲线123光吸收定律化工分析

8.1.1光吸收的本质光是一类电磁辐射，属于电磁波领域内的能量传播。光具有一定的波长和频率。一定波长的光称为单色光。由不同波长的光复合而成的光称为复合光。化工分析

8.1.2光吸收曲线精确地描述某种物质的溶液对不同波长光的选择吸收情况，可以通过实验测绘光吸收曲线。为此，用不同波长的单色光照射一定浓度的吸光物质的溶液，测量该溶液对各单色光的吸收程度(即吸光度A)。化工分析

8.1.2光吸收曲线图8-1化工分析

8.1.3光吸收定律当单色光通过含有吸光物质的稀的、均匀溶液时，由于溶液吸收了一部分光，光通量就要减小。化工分析

8.1.3光吸收定律图8-2化工分析

8.1.3光吸收定律在分光光度法中还经常以透射比倒数的对数表示溶液对光的吸收程度，称为吸光度，用A表示。化工分析

8.1.3光吸收定律光的吸收定律，称为朗伯-比尔定律化工分析

8.2显色反应及其应用显色剂的选择显色反应条件123应用实例化工分析

8.2.1显色剂的选择与待测组分形成有色化合物的试剂叫做显色剂。在选择显色反应和显色剂时，应尽量满足下列要求：?灵敏度高。?选择性好。?有色化合物组成恒定、化学性质稳定。?有色化合物和显色剂之间的颜色有较大的差别。?显色反应条件易于控制。化工分析

8.2.1显色剂的选择显色剂可分为无机显色剂和有机显色剂两大类?无机显色剂?有机显色剂利用两种试剂与待测物质形成三元配合物的显色反应(三元配合物是指由三个组分形成的配合物)，选择性与灵敏度都好。化工分析

8.2.2显色反应条件8.2.2.1显色剂用量显色剂的适宜用量可通过实验来确定，其方法是将待测组分浓度及其他条件固定，分别加入不同量的显色剂，测定吸光度，绘制吸光度与显色剂浓度的关系曲线化工分析

8.2.2显色反应条件图8-3化工分析

8.2.2显色反应条件8.2.2.2溶液的酸度显色反应的适宜酸度一般通过实验来确定，其方法是固定待测组分及显色剂浓度，改变溶液的pH，分别测定吸光度，作出吸光度与pH关系曲线。化工分析

8.2.2显色反应条件图8-4化工分析

8.2.2显色反应条件8.2.2.3温度和显色时间显色反应速率有快有慢。多数显色反应在室温下几分钟即可完成，颜色深度很快达到稳定状态。有些显色反应速率较慢，需经较长时间颜色才能稳定，这种情况下可适当加热。因此应根据显色反应时间和有色化合物的稳定时间，来确定吸光度的测量时间，过早或过晚都会产生测定误差。化工分析

8.2.2显色反应条件8.2.2.4溶剂显色反应所用溶剂影响有色化合物的稳定性、溶解度和测定的灵敏度。多数显色反应可在水溶液中进行。但有些有色化合物在水中溶解度较小，离解度大；而在某种有机溶剂中溶解度大，离解度小，这样溶液中就会有更多的吸光分子，从而提高了测定的灵敏度。化工分析

8.2.2显色反应条件8.2.2.5干扰及消除试液中除了待测组分外，往往含有其他共存离子。若其他离子本身有色或能与显色剂作用生成有色化合物，都将干扰测定。一般可采用下列方法消除其他共存离子的干扰。?控制酸度。?掩蔽。?改变干扰离子的价态。化工分析

8.2.3应用实例8.2.3.1微量铁的测定化工产品或环境试样中往往含有微量铁，可用比色或分光光度法加以测定。按照所用显色剂的不同，已有多种测定铁的方法。?磺基水杨酸法?硫氰酸盐法?邻二氮杂菲法?2,2′-联吡啶法化工分析

8.2.3应用实例8.2.3.2某些有机物的测定在有机化工生产过程中，由于副反应、分离不完全等因素，产品中往往含有微量其他有机物。在不具备紫外分光光度计和气相色谱仪(见第九章)的情况下，可以利用显色反应测定一些有机物。?微量羰基化合物?微量挥发酚化工分析

8.3分光光度计及其操作仪器的组分光光度计722型分光光度计754C型紫外-可见分光光度计光度测量条件的选择化工分析

8.3.1仪器的组成测量溶液对不同波长单色光吸收程度的仪器称为分光光度计。它包括光源、单色器、吸收池、接收器和测量系统等五个组成部分。图8-5化工分析

8.3.2721型分光光度计721型分光光度计采用钨丝灯光源、棱镜单色器和GD7型光电管接收器，适用波长范围为360～800nm。接收器输出的电信号经放大后，由指针式电流表指示吸光度和透射比。化工分析

8.3.2721型分光光度计图8-6化工分析

8.3.2721型分光光度计8.3.2.1主要调节器?波长调节器(λ)由波长选择旋钮和读数盘组成。?调0%T电位