cw2578 annexin egfppi凋亡检测试剂盒.pdfVIP

版本号

Annexin

V-EGFP/PI

Apoptosis

Detection

Kit

Annexin

V-EGFP/PI

凋亡检测试剂盒

号：CW2578

保存：2-8

℃避光保存

组分说明

Cat.No.CW2578

KitSize50

4×BindingBuffer10ml

PropidiumIodide,PI500μl

AnnexinV-EGFP250μl

产品简介

AnnexinV-EGFP/PI凋亡检测试剂盒是一种采用AnnexinV-EGFP与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。

细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，

使PS在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这

种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS在细胞膜外。AnnexinV具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度

的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可

发生在细胞坏死中。两种细胞方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完

整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）不能通过完整的活细胞，但能够对坏

死和凋亡晚期的细胞进行染色，因此通常将AnnexinV与PI配合染色，以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。

注意事项

1.细胞时不能用含EDTA的胰酶。

2.本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。

3.需自备PBS和去离子水。

4.荧光均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

5.PI对有刺激性，请注意适当防护。

6.请穿实验服并戴手套操作。

操作步骤

1.细胞样品的准备：

a.对于贴壁细胞：收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打

下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心

3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。吸除上清，

可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，吸

除上清。再次加入1ml4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。

b.对于悬浮细胞：1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离

心时间或稍稍加大离心力。吸除上清，可以残留