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实验室无菌环境的监控和检测

微生物检测人员天天都需要在无菌室工作，在超净台或者生物安

全柜里操作，为了保证我们检测的准确性，我们必须要求无菌室以及

工作台符合要求，那我们应该怎样进行验证呢？

一、紫外灯杀菌效果检查

紫外灯在使用过程中辐射强度会逐渐降低，影响其杀菌效果，

故应该定期检查。紫外灯的杀菌有效波长是253.7nm,其强度可以用中

心波长254nm的紫外线强度计测定。在没有紫外线强度计的情况下可

以采用生物学替代。

生物学测试简要步骤如下：选用枯草芽泡杆菌ATCC9372,制成

1OcFU/m11OCFU/m1浓度的菌悬液；选用经脱脂处理的0.5CnIX1oCm

大小的布片或铝片，高压灭菌后用作载体；每个载体上滴一滴制备好

的菌悬液，干燥后备用；将个染菌载体放于无菌器皿中，置于紫外

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灯下处，开启紫外灯照射，于、、和各取出个

Inr15m0.5h1h1.5h2h2

染菌载体，分别投入盛有5m1缓冲蛋白陈水的洗脱液；系列稀释后进

行平板计数；同法取个染菌载体用做阳性对照，操作除不经紫外此

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昂照射外与试验组相同。

杀灭率二（阳性对照回收菌数-试验组回收菌数）/阳性对照回收

菌数X1O0%

杀灭率大于99.9%时，认为紫外灯杀菌效果合格。

二、无菌室空气质量检查

无菌室空气质量检查应按照采样计划，根据情况对处于空态、静

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态和正常运行的风险区，使用适当的仪器采集空气中微生物，测定并

监控风险区空气的微生物污染。空气悬浮微生物的采样和计数方法多

种多样，根据多需采样目的决定具体的采样方法和采样器。因采样器

的采集效率不同，应慎重选择合适的方法和设备。采样器分为两类：

被动式采样器，如落菌盘；主动式采样器，如过滤采样器、撞击采样

器、冲击采样器等。

1沉降法

落菌盘等被动式空气微生物采样器不能测量空气中的微生物的

总数，而是测量空气中微生物在表面的沉降率。只要确定单位时间落

菌盘上微生物的数量，再根据落菌盘的暴露面积与暴露时间之间的关

系，即可大致计算出空气中微生物的数量。

面积小于命的室内设一条对角线取点，在其中心以及两端距

303

墙处各取点；面积大于的室内房间四面距墙和中央各放

InI130∏)2ι

m

置一个平皿，高度为实验台高度。培养基平皿开盖暴露IonIir1,然后盖

上盖子倒放，培养48h,计数每个平皿上的菌落数。

日常监控时，可以设定可接受的菌落数限值。一般无菌室所有的

取样平皿上的细菌总数应小于15个。空气质量良好的无菌室，通常么

个平皿上生长的细菌不超过个。

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