大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)-NEWA.pdfVIP

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大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)-NEWA--第1页

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)ELISA检测试剂盒3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

使用说明书4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟

检测原理取上清。

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于

先包被大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体的包被微孔中,依次加-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底自备物品

物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用1.酶标仪(450nm)

下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大肠杆菌宿主残留蛋2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

白(E.coliP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD3.37℃恒温箱

值),计算样品浓度。操作注意事项

样品收集、处理及保存方法1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的

1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解

刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地后再使用。

分离。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

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3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明洗板方法

书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

试剂盒组成操作步骤

名称96孔配置48孔配置备注1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封

微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无袋密封放回4℃。

标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无

样本稀释液6mL3mL无2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

检测抗体-HRP10mL5mL无

20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不

底物A6mL3mL无

底物B6mL3mL

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