消化实验方法总结.pdfVIP

《豆粕粉碎粒度与蛋白质体外消化率的关系研究》

《《豆豆粕粕粉粉碎碎粒粒度度与与蛋蛋白白质质体体外外消消化化率率的的关关系系研研究究》》

-

--

采用胃蛋白酶胰酶两步法，通过体外模拟鸡体消化道内环境来比较不同粉碎力度豆粕的蛋

采用胃蛋白酶采用胃蛋白酶胰胰酶酶两两步步法法，，通通过过体体外外模模拟拟鸡鸡体体消消化化道道内内环环境境来来比比较较不不同同粉粉碎碎力力度度豆豆粕粕的的蛋蛋

白消化率，从而确定适合肉仔鸡生长的较适宜豆粕粉碎力度。

白白消消化化率率，，从从而而确确定定适适合合肉肉仔仔鸡鸡生生长长的的较较适适宜宜豆豆粕粕粉粉碎碎力力度度。。

GB6971-86BoisenFernandez

平均粒径采用GGBB-8866方法，体外试验采用BBooiisseenn和FFeerrnnaannddeezz等体外模拟消化方法。

平平均均粒粒径径采采用用方方法法，，体体外外试试验验采采用用和和等等体体外外模模拟拟消消化化方方法法。。

胃蛋白酶最适浓度的选择

胃胃蛋蛋白白酶酶最最适适浓浓度度的的选选择择

1g

11gg豆皮→100ml三角瓶+25ml磷酸缓冲液（pH6.0

0.01M）+10ml盐酸（0.2M）→温和搅拌

豆豆皮皮→→110000mmll三三角角瓶瓶++2255mmll磷磷酸酸缓缓冲冲液液（（ppHH66..00

00..0011MM））++1100mmll盐盐酸酸（（00..22MM））→→温温和和搅搅拌拌

+1ml(15mg/ml,30mg/ml,45mg/ml,60mg/ml,75mg/ml,90mg/ml)的新鲜胃蛋白酶溶液（由

++11mmll((1155mmgg//mmll,,3300mmgg//mmll,,4455mmgg//mmll,,6600mmgg//mmll,,7755mmgg//mmll,,9900mmgg//mmll))的的新新鲜鲜胃胃蛋蛋白白酶酶溶溶液液（（由由

0.01M

HCl

配制），pH2.0

+0.5ml抑菌剂（青霉素+链霉素）→39℃恒温水浴中震荡6h,消

00..0011MM

HHCCll

配配制制）），，ppHH22..00

++00..55mmll抑抑菌菌剂剂（（青青霉霉素素++链链霉霉素素））→→3939℃℃恒恒温温水水浴浴中中震震荡荡6h,6h,消消

化后+20%黄基水杨酸5ml→室温静置30min→抽滤→干燥后残渣凯式定氮法测蛋白质含量→

化后化后++2200%%黄黄基基水水杨杨酸酸5ml5ml→→室室温温静静置置3300mmiinn→→抽抽滤滤→→干干燥燥后后残残渣渣凯凯式式定定氮氮法法测测蛋蛋白白质质含含量量→→

计算蛋白质和干物质消化率。确定最适胃蛋白酶浓度为75mg/ml.

计计算算蛋蛋白白质质和和干干物物质质消消化化率率。。确确定定最最适适胃胃蛋蛋白白酶酶浓浓度度为为7755mmgg//mmll..

胰酶最适浓度选择

胰胰酶酶最最适适浓浓度度选选择择

75mg/m10ml0.2MpH=6.8

7755mmgg//mm1100mmll00..22MMppHH==66..88

在最适（）胃蛋白酶液消化后的产物中加入磷酸缓冲液（）

在在最最适适（（））胃胃蛋蛋白白酶酶液液消消化化后后的的产产物物中中加加入入磷磷酸酸缓缓冲冲液液（（））

+5mlNaoH(0.6M)+1ml(70mg/ml,90mg/ml,110mg/ml,130mg/ml,150mg/ml)

+5mlNaoH(0.6M)+1ml(70mg+5mlNaoH(0.6M)+1ml(70mg/ml,90mg/ml,90mg/ml,110mg/ml,110m