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弥散性血管内凝血动物模型制作具体步骤及方法

弥散性血管内凝血(disseminatedintravascularcoagulation,DIC)是临

床上一种获得性综合征，它可由各种不同的原因引发。临床上DIC主

要表现为由微血管血栓形成和栓塞引起的多脏器功能障碍、出血、休

克和微血管病性溶血性贫血。DIC代表了临床病理的一系列连续的

严重表现，其主要特征是血管内凝血机制激活后，其局限性或代偿性

控制进行性丧失。DIC的发生及发展机制十分复杂，许多影响因素至

今仍未阐明。无论在何种原发病或何种因素诱导下发生DIC，机体凝

血系统活化均既存在顺序性级联反应的特征，也存在正、负反馈使凝

血反应放大或受到限制的特征。DIC时通常显示纤维蛋白分布在多

种器官中，是导致器官功能衰竭的原因。抗凝治疗是阻断DIC病理过

程的重要措施之一，其目的在于抑制广泛性微血栓形成的病理过程，

防止血小板及各种凝血因子进一步消耗。为恢复其正常含量、重建正

常的凝血与抗凝血平衡创造条件。因此，建立理想的DIC动物模型，

用于实验研究非常重要。

1高分子右旋糖酐诱导大鼠弥散性血管内凝血模型

(1)复制方法体重为250～400g、10月龄雄性Wistar大鼠。按

30mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨钠麻醉，大鼠仰卧

固定于手术台上，颈部皮肤常规消毒与去毛。无菌手术暴露颈动脉、

静脉，分别插管。用130g/L高分子右旋糖酐(分子量为480000)按

15ml/kg体重的剂量经颈静脉注射，1min或3min注完。于给药*min

及给药后10、20、30min进行微循环观察，经显微电视录像观察回肠

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下段肠系膜血管(包括一二级微动脉和一二级微静脉)流态以及微血流

流态、血细胞聚集情况；给药后30min时，经模型大鼠颈动脉取血作

相关凝血功能指标的检测，并进行血浆鱼精蛋白副凝试验(3R试验)；

主要观察指标：模型大鼠微循环积分值、全血黏度、血浆黏度、相对

黏度、血小板黏附率和聚集率、血小板计数、血浆凝血酶原时间、纤

维蛋白原水平、裂体细胞检查。注射后30min麻醉处死大鼠，分别取

其肺、肾、心等组织经10％甲醛溶液固定后，作常规组织切片，HE

染色，光镜下形态学观察。

(2)模型特点模型动物微血管流态变化突出，注射高分子右旋糖酐后

流速变慢、血细胞淤滞、聚集、微血流呈粒缓流，出现严重的微循环

障碍。用田牛氏微循环加权积分标准计算流态积分值，发现模型大鼠

流态积分值明显高于实验前和正常对照动物，这些变化细动脉比细静

脉更明显。造模后，模型动物血小板黏附率、聚集率明显增强，血小

板计数显著减少，凝血酶原时间延长，纤维蛋白原降低，与正常动物

相比有显著性差异；模型动物3R试验均为阳性。镜下病理组织学观

察显示：模型大鼠可见纤维索性血栓和混合血栓，尤以肺内多见，其

血涂片可见大量裂体细胞。本方法复制的大鼠DIC模型属于急性型，

其特点为凝血因子的消耗性减少、继发纤溶系统的亢进、血液流变学

和微循环的明显障碍。本模型制作方法简便，应用范围广，效果稳定。

(3)比较医学本模型的致病机制是当静脉注射高分子右旋糖酐后，模

型大鼠微血流积分值升高，血流变慢；血液流动性的异常，导致了机

体血管舒缩功能的紊乱，为DIC的发生创造了条件，此时无论血管收

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弥散性血管内凝血动物