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单克隆抗体技术;疫苗和抗体的研制,是生物技术发展的永恒主题。
目前在美国单克隆抗体类药物已占FDA所批生物药的3/4。;美国已上市16种单克隆抗体药物
2002年销售额29亿美元
2005年90亿美元
我国的单克隆抗体药物市场还处于起步阶段,更谈不上抗体组药物的发展。
;抗体是对其抗原有极强专一性的
魔弹或巡弋飞弹;抗体药物销售趋势图;生物技术;●至2000年底,在美国药品市场上生物技术药物有76种,其中抗体药物有15种。
●2003年治疗用单抗销售总额已超过52亿美元。
●2006年预计50-60个治疗性单抗上市。
●2010年预计单抗销售额200亿美元。
●美国已占全球单抗市场90%—一支独秀。
●完全人源化单抗现有多个处于临床前阶段;多克隆抗体;;整体水平抗体生成技术;多克隆抗体(polyclonalantibody)
指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。
如:免疫血清(含多种特异性抗体)。
实际意义:
(1)预防、治疗感染性疾病,
如:破伤风抗毒素血清?抗破伤风,
胎盘球蛋白?抗病毒感染等
副作用:?超敏反应
(2)临床诊断,如:肥达氏反应--伤寒、副伤寒
缺点:特异性差。;抗体体内生成的理论;传统抗血清;;单克隆抗体;杂交瘤技术的理论基础;;细胞DNA合成途经;m;HAT选择培养基的原理;
抗原免疫的脾细胞小鼠骨髓瘤细胞(B细胞)(B细胞恶性肿瘤)1.抗体分泌(Ig+)1.具永生性2.HGPRT+在HAT生长2.8-AG筛选出
HGPRT-株
PEG融合HAT筛选
脾-骨髓瘤细胞(杂交瘤细胞)
(HGPRT+、Ig+)
;融合的结果及命运;免疫动物培养骨髓瘤细胞
收集致敏的B淋巴细???收集骨髓瘤细胞
细胞融合
HAT选择培养基筛选杂交瘤细胞
检测筛选阳性细胞
克隆化培养(反复3-5次)
获得稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株
McAb的制备(杂交瘤培养上清或诱生腹水)
McAb纯化及鉴定
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