饲料中土霉素的测定 编制说明.docx

《饲料中土霉素的测定》编制说明

（征求意见稿）

一、工作简况

1.1任务来源

2024年河南省农畜水产品检验技术研究院与陕西省畜牧技术推广总站合作承担了国家市场监督管理总局标准技术管理司下达的国家标准制修订项目，任务名称为“《饲料中土霉素的测定》国家标准制修订项目”，合同编号为T-NY-2024-002-003，本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。因此，我们在GB/T22259－2008《饲料中土霉素的测定高效液相色谱法》的基础上，参考国内相关检测方法结合实验结果起草本标准。

1.2制订背景

土霉素（Oxytetracycline，OTC）又称地霉素、氧四环素，属于四环素类抗生素，CAS号为79-57-2，分子式为C22H24N2O9，分子量460.43。它是淡黄色的晶体粉末，熔点为182℃,微溶于乙醇，极微溶于水。土霉素在空气中非常稳定，遇到光颜色变暗，在碱性溶液中容易被破坏。土霉素的分子结构式如图1所示，从结构来分析，由于含有二甲氨基，因此能够显碱性，同时又含有酚羟基和烯醇基，所以又能够显酸性，因此土霉素是一种两性化合物，且易溶于酸性或碱性溶液。

图1.土霉素的结构式

土霉素能够阻止细菌核糖体酰氨-tRNA同核蛋白结合，抑制蛋白肽链的延长，以及抑制革兰氏阳性和阴性菌、支原体、衣原体、立克次氏体及滤过性病毒等微生物的生长繁殖，用来治疗呼吸道感染和胃肠道感染所引起的疾病。具有广谱抗菌性以及价格低廉的特点，被广泛应用于养殖业领域，用于畜禽疾病的治疗和预

防，还可以亚治疗剂量添加于动物饲料，起到刺激动物生长和促进增产的作用。为了规范饲料中土霉素的使用，原农业部第168号公告中曾规定了土霉素钙预混剂在饲料中的使用规范：适用动物为猪、鸡。混饲，每1000kg饲料添加，猪10-50g（4月龄以内），鸡10-50g（10周龄以内），均以有效成分计。而实际生产过程中，有一些饲料厂及养殖企业在利益的驱使下往往会违规添加使用土霉素钙预混剂，从而使动物产生耐药性及药物残留，进而危害人们的身体健康。为维护我国动物源性食品安全和公共卫生安全，根据农业农村部第194号公告、第246号公告要求，已停用土霉素产品并注销其进口兽药注册证书。《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》（GB31650-2019）中也对土霉素/金霉素/四环素在动物性食品中的最大残留限量做出了规定，见表1。这些政策法规的颁布对饲料质量安全监管提出来更高的要求。

表1GB31650-2019中对土霉素的最大残留限量的规定

动物种类

靶组织

残留限量μg/kg

牛/羊/猪/家禽

肌肉

200

肝

600

肾

1200

牛/羊

奶

100

家禽

蛋

400

鱼

肌肉

200

虾

肌肉

200

目前饲料中土霉素检测的现行国标方法为《饲料中土霉素的测定高效液相色谱法》（GB/T22259-2008），采用0.05mol/l盐酸溶液提取样品中的土霉素，高效液相色谱-紫外检测法检测，该方法存在空白干扰大、回收率低、适应性差等问题，并且高效液相色谱检测法灵敏度较低，不能准确定性，无法满足当前的监管需求。因此，亟需对GB/T22259-2008进行修订，在对液相方法进行优化的基础上，增加灵敏度高、定性准确的液相色谱-串联质谱法，为饲料质量安全监管提供技术支撑，从源头保障畜产品质量安全。

在参考国内外相关检测方法的基础上，结合试验结果起草本标准，本标准采用高效液相色谱法和高效液相色谱-串联质谱法建立了饲料中土霉素的检测方法，

标准编制过程中对样品的前处理方法和仪器条件进行了优化，得到了满意的效果。

1.3主要工作过程

本标准由河南省农畜水产品检验技术研究院（原河南省兽药饲料监察所）和陕西省畜牧技术推广总站负责制定工作。技术归口单位是全国饲料工业标准化技术委员会。工作流程：立项—成立工作组—查阅国内外资料—收集样品并进行试验—起草标准文本—标准复核—征求意见—预审—送审—报批。

1.3.1成立标准起草小组

2024年1月，我单位接到标准制定任务后，由河南省农畜水产品检验技术研究院与陕西省畜牧技术推广总站共同成立了工作组负责本标准的起草工作。同时对标准起草工作进行了分工，明确各自任务和职责，以确保项目的顺利实施。

1.3.2文献研究和试验

2024年2月到3月，课题组组织技术人员通过大量查阅国内外有关文献，全面掌握了土霉素的化学结构、理化特性等。在此基础上，2024年4月到7月，参考已有的文献资料，针对饲料中土霉素的检测方法、仪器条件、方法线性、灵敏度和精确度等进行探索，确定了饲料中土霉素的检测方法。并在实验室进行了多次试