酶反应动力学.ppt

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第29页,共54页,星期六,2024年,5月第30页,共54页,星期六,2024年,5月c在一定条件下,Km表示酶与底物的亲和力有些酶有很多底物,Km值最小的底物叫此酶的最适底物,也叫酶的天然底物。d已知Km,可以求出V/Vmax与底物浓度[S]的关系。测定Km的意义:(以上4点)第31页,共54页,星期六,2024年,5月UnderstandingKmKmisaconstantderivedfromrateconstantsKmis,undertrueMichaelis-Mentenconditions,anestimateofthedissociationconstantofEfromS,because atequilibrium,Reversiblereaction,dissociationconstantisSosmallKmmeanstightsubstratebinding;highKmmeansweaksubstratebinding.Kmequalstothesubstrateconcentrationatwhichv=1/2vmaxk1k-1第32页,共54页,星期六,2024年,5月UnderstandingVmaxThetheoreticalmaximalvelocityVmaxisaconstantVmaxisthetheoreticalmaximalrateofthereaction-butitisNEVERachievedinrealityToreachVmaxwouldrequirethatALLenzymemoleculesaretightlyboundwithsubstrateVmaxisassymptoticallyapproachedassubstrateisincreased第33页,共54页,星期六,2024年,5月米氏常数的测定双倒数作图法,即Lineweaver-Burk法。1/V对1/S作图第34页,共54页,星期六,2024年,5月第二节双底物酶促反应动力学双底物双产物反应A+B P+Q双底物双产物的反应按动力学机制可分为两大类:双底物双产物的反应序列反应(sequentialreactions)乒乓反应(pingpongreactions)有序反应(orderdreactions)随机反应(randomreactions)第35页,共54页,星期六,2024年,5月序列有序反应;序列随机反应;乒乓反应;EAEAEBQEPQEEABPQA+EAEB+EEBAEBQEPQEEPQ+EE+PEAEPEEEBEQABPQE第36页,共54页,星期六,2024年,5月1.序列有序反应

第37页,共54页,星期六,2024年,5月2.序列随机反应

第38页,共54页,星期六,2024年,5月3.乒乓反应第39页,共54页,星期六,2024年,5月第三节酶反应影响因素温度的影响酶的最适温度(optimumtemperature)温度影响的两个方面:1.温度升高,酶反应速度增加在达到最适温度之前提高温度,可以增加酶促反应的速度。第40页,共54页,星期六,2024年,5月2.温度升高,酶蛋白变性而失活。在最适温度以前,第1种影响为主。在最适温度以后,第2种影响为主。大部分酶在600C以上变性,到700C-800C酶达到不可逆变性;少数酶能耐受较高的温度,如细菌淀粉酶在950C下活力最高,又如牛胰核糖核酸酶加热到1000C仍不失活。第41页,共54页,星期六,2024年,5月第42页,共54页,星期六,2024年,5月pH的影响

非特征性常数,只在一定情况下才有意义。?1、?最适pH当酶反应速度受pH影响,当某个pH,酶表现最大活力,此pH就是pH(opt)。pH(opt)不是酶的特征性常数,受测定环境的影响很大。

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