《GBT 43279.1-2023分子体外诊断检验 静脉全血检验前过程的规范 第1部分：分离细胞R.pptx

《GB/T43279.1-2023分子体外诊断检验静脉全血检验前过程的规范第1部分：分离细胞RNA》必威体育精装版解读;目录;目录;目录;目录;目录;目录;PART;发布与实施;提升诊断准确性;;PART;;根据检测项目要求，指导患者采血前是否需要空腹或避免高脂、高糖等食物摄入。;采集时间;PART;;尽快进行离心处理，分离血浆与血细胞，避免RNA降解。;;分离后的细胞应立即进行RNA提取，避免长时间保存导致的RNA降解。;;;;;PART;选择合适的采集容器;;PART;根据检验项目要求，选用合适的采血针、采血管和抗凝剂。;采血前准备;PART;;优化建议;PART;;;分离细胞RNA的标准化操作流程;分离后仔细检查细胞纯度，确保分离效果。;;;;分离细胞RNA的标准化操作流程;;PART;;OD260/OD280比值;完整性评估;PART;呼吸防护;清洁与消毒;;根据实验样本中可能存在的病原体种类和浓度，确定实验室的生物安全等级，并采取相应的防护措施。;;PART;;;PART;常见问题;;PART;提升检验准确性

GB/T43279.1-2023标准通过规范静脉全血检验前过程中分离细胞RNA的步骤，减少了因操作不规范导致的分子含量和完整性变化，从而显著提升了分子体外诊断检验的准确性。这对于疾病的早期诊断、治疗方案的选择及疗效评估具有重要意义。

保障医疗质量与安全

该标准的实施，确保了医学实验室在进行分子体外诊断检验时，能够遵循统一的、科学的操作流程，减少了人为因素对检验结果的影响。这对于保障医疗质量与安全，维护患者权益具有不可估量的价值。;;促进多领域协作;PART;;;;;;PART;实验室设备;实验室试剂;PART;;实验器具消毒;选择远离通风孔或开放窗口、走动较少的区域作为RNase-free区域，减少空气中的核糖核酸酶A污染^[2]^。;PART;;;;;;对于低质量或降解严重的RNA样本，考虑重新采集或采用更严格的提取条件。;;长期储存的RNA样本，定期检查其完整性，必要时重新提取。;;遵循严格的实验操作规范，减少人为因素对RNA提取质量的影响。;;PART;;;高纯度提取试剂盒;RNA稳定性保护策略;建立RNA完整性评估体系;PART;纯度指标

RNA提取的纯度直接影响后续实验的结果。纯度的评估通常通过紫外分光光度计测量OD260/OD280的比值进行，理想值应在1.8-2.0之间。当OD260/OD2801.8时，表明RNA样品中可能存在蛋白质残留；而当OD260/OD2802.2时，则提示RNA可能已部分水解为单核苷酸。此外，OD260/OD230的比值也用于评估RNA的纯度，高值表示RNA中碳水化合物、多肽、苯酚等污染物较少。;;;RNA提取纯度与后续实验的关系;严格操作环境;PART;;样本处理不当可能导致检测结果出现偏差，包括假阳性或假阴性结果。;医疗资源浪费;PART;;;RNA纯度检测;;PART;RNA提取过程中的安全防护措施;溶液配制

配制溶液时，应使用无RNase的水，可通过加入DEPC处理获得，但需注意DEPC具有致癌性，操作时应小心谨慎。配制的溶液应尽可能用0.1%DEPC处理，并在37℃处理12小时以上，之后用高压灭菌除去残留的DEPC。

样品处理与储存

样品采集后应迅速液氮冷冻，并于-80℃冰箱保存，以减少RNA降解的风险。在RNA提取过程中，应尽量减少抽提时间，避免RNA长时间暴露在空气中，同时保持低温操作。;RNA提取过程中的安全防护措施;PART;28S/18S比值;分光光度法;OD260/OD280比值;电泳图谱分析;PART;;;分离细胞RNA实验中的误差来源分析;温控不当

实验过程中未严格控制温度，导致RNase活性增强，加速RNA降解。;分离细胞RNA实验中的误差来源分析;;;PART;;可能是由于样品处理不当、提取试剂质量不佳或提取方法不当导致的。;;PART;高质量的RNA应保持完整，无明显降解，以确保后续PCR实验数据的准确性。;样品处理;加强实验操作培训与质控;PART;分离细胞RNA的最佳实践指南;分离细胞过程中，应严格控制操作温度和时间，避免RNA酶的激活。;;分离细胞RNA的最佳实践指南;;长期保存的RNA样品应定期检查质量，确保其在需要时仍可用于后续实验。;分离细胞RNA的最佳实践指南;分离细胞RNA的最佳实践指南;;PART;;;采集后处理;溶血会影响细胞RNA的提取和质量，因此采集过程中需特别注意避免溶血的发生。;PART;RNA提取中的质量控制点;对于不同类型的样本（如细胞、组织），需采用适当的匀浆或裂解方法。;;RNA提取中的质量控制点;质量检测：;RNA提取中的质量控制点;;长时间存储时，应定期检查RNA质量，确保其完整性。;;P