分离分析法导论课件.pptVIP

仪器分析一、色谱分析法及其基本概念1、色谱法的发展1906年，俄植物学家M.Tswett分离植物色素植物叶的色素组成叶绿素a（蓝绿色）叶绿素b（黄绿色）胡萝卜素（橙色）叶黄素（黄色）浙江万里学院生物与环境学院

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仪器分析2、色谱法分类（1）按流动相和固定相所处状态分n气相色谱（GC）气液色谱（固定相为固定液，即固定相是附着在惰性载体上的一薄层有机化合物液体）气固色谱（固定相是固体吸附剂）n液相色谱（LC）液液色谱液固色谱（2）按固定相的固定方式分n柱色谱（固定相装于柱内的色谱法）n纸色谱（固定相是滤纸上的水分，呈平板状）n薄层色谱（固定相是吸附剂粉末制成的薄层，呈平板状）浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析（3）按分离原理分n吸附色谱（利用组分在固定相上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法）n分配色谱（利用组分在（固定相）中溶解度不同而达到分离的方法称为分配色谱法）n离子交换色谱（利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同而达到分离的方法）n排阻色谱（利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的方法，又称凝胶色谱法）浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析3、色谱图及常用术语（1）色谱图：试样各组分经色谱分离后，从柱后流出进入检测器，检测器将各组分浓度（或质量）的变化转换为电信号（电压或电流），再由记录仪记录下来，所得的电信号强度随时间变化的曲线，即为流出曲线，也称为色谱图，曲线上突起部分就是色谱峰。浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析（2）常用术语①基线：柱中只有流动相流过时，检测器的响应信号记录值，稳定的直线应是一条水平直线。②峰高h：色谱峰顶点与基线的垂直距离峰宽：峰底宽Y半峰宽：1/2h处的峰宽，Y1/2标准偏差：0.607h处的峰宽为2?峰面积：浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析③保留值：表示试样中各组分在色谱柱内停留状况的指标，反映组分分子与固定相分子间作用力的大小，通常用时间和流动相的体积表示。用时间表示的保留值（单位：min，s等）死时间（t）：不被固定相保留的组分，从进样到出现最大峰所n0需的时间，也即流动相流经色谱柱所需的时间保留时间（t）：试样从进样到出现最大峰所需的时间nR调整保留时间（t’）：t’=t-tnRRR0用体积表示的保留值（单位：mL）死体积（V）：不被固定相保留的组分，通过色谱柱所消耗的流动相n0体积，由死时间确定保留体积（V）：试样从进样到出现最大峰所通过的流动相体积nR调整保留体积（V’）：V’=V-VnRRR0相对保留值（?）：也称选择性因子，为两组分的调整保留值之比2,1一般选择tR2’大于t越大，分离效果越好。’R1，所以?值大于1，?浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析色谱峰的个数——判断组分的个数nnnnn色谱峰的保留值——定性分析色谱图信息色谱峰的面积或峰高——定量分析相对保留值?——固定相与流动相的选择是否合适保留值、区域宽度——评价色谱柱分离效能的好坏浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析（3）分配平衡样品组分在固定相与流动相之间进行多次分配使其得到分离。浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析色谱分离原理及分离参数样品在固定相与流动相之间进行分配，很快达到平衡，即分配平衡。当流动相流过时，样品将在流动相和新的固定相中又达到分配平衡，同时原来仍在固定相中的样品与新的流动相之间也会形成新的分配平衡，随着流动相的不断流过，它们携带发生分配平衡后仍存在于流动相中的样品沿着柱子向前流动，从而达到不同组分分离的目的。（组分在固定相中的浓度）分配系数（组分在流动相中的浓度）（组分在固定相中物质的量）分配比（组分在流动相中物质的量）浙江万里学院生物与环境学院

仪器分析分配系数影响因素：组分、流动相和固定相的热力学性质；温度和压力等因素。分配比影响因素：组分、流动相和固定相的热力学性质；温度和压力等因素；流动相及固定相的体积。（组分在固定相中的量越多，相当于柱的容量大，因此分