氧化苦参碱对偏头痛模型小鼠行为学和血清NO含量的研究.docx

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氧化苦参碱对偏头痛模型小鼠行为学和血清NO含量的研究

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【摘要】目的：以氧化苦参碱作为镇痛药物研究其对偏头痛模型小鼠的镇痛效果，观察其前后行为学变化和血清NO的含量。方法：将30只健康KM小鼠随机分为假模型组、模型对照组、氟桂利嗪组、高剂量氧化苦参碱组、中剂量氧化苦参碱组、低剂量氧化苦参碱组。在30min内观察研究中小鼠的行为学变化，以硝酸还原酶法测量血清NO含量。结果：低剂量氧化苦参碱组的平均挠头次数和血清NO含量与模型对照组比较，差异不显著(P＞0.05)，然而在平均爬笼次数水平上与之比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。其余各组在血清NO含量，挠头次数和爬笼次数与模型对照组的比较中差异显著，有统计学意义(P＜0.05)。结论：氧化苦参碱对偏头痛模型小鼠的镇痛效果显著。

【关键词】氧化苦参碱；偏头痛；行为学；

1前言

偏头痛是一种主要以患者单侧或双侧搏动性头痛为特征的原发性头痛，临床上主要使用选择性5-HT受体激动剂曲坦类药物，但是该药物依赖进口，价格较贵，且对存在心血管问题的病人需谨慎使用。氧化苦参碱主要是从我国传统药物苦参的干燥根及其他植物提取的生物碱，药理作用广泛，本实验主要探究氧化苦参碱的镇痛作用。氧化苦参碱在治疗剂量下对中枢神经系统产生抑制作用和保护功能，临床上有使用氧化苦参碱注射液或者配合西药来治疗癌痛的病例[1]。因此本实验通过观察使用氧化苦参碱前后行为学变化和测定血清NO含量来评价氧化苦参碱的镇痛效果。

2材料与方法

2.1?实验动物及分组

将健康的30只KM小鼠(SPF级，湖南斯莱克景达实验动物有限公司，合格证号：SCXK湘2019-0004)随机平均分为六组，每组5只，分别为假模型组、模型对照组、低剂量氧化苦参碱组、中剂量氧化苦参碱组、高剂量氧化苦参碱组和氟桂利嗪（阳性对照组）组。小鼠体重在18～22g。

2.2实验试剂及器材

苦参素胶囊(正大天晴药业集团公司，主要成分氧化苦参碱，每粒0.1g)，盐酸氟桂利嗪胶囊（西安杨森制药公司，主要成分氟桂利嗪，每粒5mg），硝酸甘油注射液（河南润弘制药公司，1ml：5mg），一氧化氮（NO）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所），分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司），TGL-16台式高速冷冻离心机（湖南湘仪仪器开发有限公司）。

2.3实验方法

假模型组和模型对照组腹腔注射生理盐水5天，低剂量组、中剂量组、高剂量组分别腹腔注射50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg氧化苦参碱5天，阳性对照组灌胃注射4mg/kg氟桂利嗪5天。于最后一次注射30min后，除假模型组在小鼠头颈部皮下注射生理盐水外，其余各组均是头颈部皮下注射10mg/kg硝酸甘油制备偏头痛模型。当小鼠在注射硝酸甘油造模30min后出现双耳发红，前肢多次挠头，爬笼次数增加等焦躁不安的症状是，可判断造模成功。

2.4行为学观察

观察小鼠一般行为，在造模30min后，分别计数各组小鼠在30min内的爬笼次数，挠头次数。

2.5血清NO指标测定

在观察完行为学表现后，摘眼球取血，用离心管取小鼠眶周静脉血，3000r/min离心15min，取上层血清，之后按照NO测定试剂盒说明书使用分光光度计测定血清NO含量。

2.6数据处理

实验数据以样本均值±标准差表示，并使用SPSS24.0软件进行统计分析，各因素不同水平下进行方差齐性检验，再使用单因素方差分析，事后比较使用LSD-t检验，P＜0.05有统计学意义。

3结果

结果显示低剂量氧化苦参碱组的平均挠头次数和血清NO含量与模型对照组比较，差异不显著（P＞0.05），然而在平均爬笼次数水平上与之比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。中剂量氧化苦参碱组和高剂量氧化苦参碱组的平均挠头次数和平均爬笼次数显著高于模型对照组（P＜0.01），血清NO含量与之比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。阳性对照组与模型对照组比较，在平均挠头次数，平均爬笼次数和血清NO含量水平上差异都有显著统计学意义（P＜0.01）。

表1氧化苦参碱对偏头痛模型小鼠挠头次数，爬笼次数和血清NO含量的影响

组别

平均挠头次数

平均爬笼次数

血清NO含量

假模型组

4.4±3.8**

2.0±1.2**

38.4±13.5**

模型对照组

17.8±7.0

8.8±4.8

72.5±16.9

低剂量氧化苦参碱组

12.8±5.0

5.4±2.7*

66.0±18.4

中剂量氧化苦参碱组

7.6±2.6**

3.2±1.3**

52.2±12.8*

高剂量氧化苦参碱组

2.8±1.7**

1.2±0.7**

47.0±15.6*

阳性对照组

3.8±3.1**

1.8±1.5**

45.5±12.4*