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选修3生物技术与工程
第3章基因工程;本节重点;什么是DNA重组？包括哪些类型？;每一种限制性内切核酸酶识别双链DNA特定的序列，;例如，限制性内切核酸酶EcoRⅠ的识别序列为5-GAATTC-3；;从而切开DNA分子的两条链。;那么它们便能在较低温度下重新“粘”在一起（即互补碱基之间形成氢键）;两种不同的限制性内切核酸酶产生的黏性末端相同;因此特别适合将两个黏性末端牢固地连为一体。;因为缺少复制所必需的特定DNA序列。;即广泛存在于微生物细胞内的质粒DNA以及存在于大多数生物体内的病毒DNA。;即广泛存在于微生物细胞内的质粒DNA以及存在于大多数生物体内的病毒DNA。;采用何种方法分离获得特定的目的基因，取决于我们对目的基因背景知识的了解程度。;PCR是一项模拟细胞内DNA复制过程的DNA体外扩增技术，;采用PCR扩增技术获取目的基因需要DNA模板、引物、DNA聚合酶、四种脱氧核苷三磷酸（dNTP）以及缓冲液系统。;系统温度缓慢降至55～68℃，使两条不同的引物分别与两条单链DNA模板结合；;将PCR扩增获得的目的基因和合适的载体用相应的限制性内切核酸酶切割出黏性末端（简称“切”），;切割目的基因和切割质粒，一定要用同种限制性内切核酸酶吗？;（1）由于目的基因两侧的黏性末端相同，因而能以正反两种方式等概率接入载体，;画出二者酶切后重新连接后形成的序列？;在自然条件下，DNA很难进入细胞。;由于在转化操作中，只有少数细胞能接纳DNA分子，;抗药性筛选法实施的前提条件是载体DNA携带抗生素的抗性基因。;而含空载质粒的克隆可出现在同时含Amp和Tet的平板上。;而含空载质粒的克隆可出现在同时含Amp和Tet的平板上。;重组DNA技术常用的大肠杆菌质粒pUC18/19同时携带Ampr和lacZ′两个标记基因。;这需要使用PCR技术和基因表达产物（蛋白质）的结构和功能分析技术。;植物的愈伤组织（或其他组织的原生质体）、生殖细胞或胚胎组织等。;将注射了DNA的受精卵移植到母鼠子宫中发育，继而繁殖转基因小鼠子代。;可以通过病毒感染的方式高效导入动物细胞中。;植物细胞的常用转化方法是用含有表达载体的根瘤农杆菌感染受体细胞。;1、简述DNA重组技术所需的??种基本工具;1、简述DNA重组技术所需的三种基本工具;1、简述DNA重组技术所需的三种基本工具;本堂小结;本堂小结;本堂小结;本堂小结
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